兔源IL－6基因启动子的克隆及转录调控

• 作者: 仇汝龙 刘星 宋艳华 徐为中 王芳 胡波 范志宇 薛家宾 魏后军
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 兔 IL-6基因 启动子 荧光素酶基因表达载体 转录调控
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 31-34
• 页数: 4页
• 分类号: S858.291|Q785
• 字数: 3631字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2016.02.008

摘要

通过体内感染兔出血症病毒后发现白介素6（Interleukin－6，IL－6）基因表达水平明显升高。为体外研究IL－6启动子的转录调控机制，寻找该基因转录调控的基本转录原件，首先利用染色体步移技术扩增得到兔IL－6基因的启动子区序列，经测序全长为763 bp；经同源性分析，与人源IL－6基因的启动子高度同源；生物信息学分析发现，该启动子序列含有AP－1、CREB／NF－IL6、NF－κB和TATA－box等转录元件。随后将全长和一系列缺失体的IL－6启动子基因（－400／＋58 bp、－250／＋58 bp、－170／＋58 bp、－100／＋58 bp）定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3－Basic中，构建了含有正确目的基因的报告基因重组体，然后瞬时转录RK－13细胞，利用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测。结果显示，本试验所克隆的 IL－6基因启动子区具有明显的活性，而且 AP－1、CREB／NF －IL6和NF－κB在IL－6基因的转录调控中有着不可或缺的作用。以上结果为进一步研究兔IL－6基因的转录调控机制奠定了基础。