SEMA3B对人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞Akt磷酸化调控作用的实验研究

• 作者: 呼群 张嘉玲 斯蒂芬·斯坦尼斯·史帕思 木其尔 毕勇毅 苏秀兰 韩汶延
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肺癌 SEMA3B IGFBP6 Akt磷酸化
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1854-1857
• 页数: 4页
• 分类号: R734.2
• 字数: 3107字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2016.12.003

摘要

目的:研究SEMA3B作为潜在的肺癌治疗药物诱导细胞凋亡作用的机制.方法:将pcDNA3.1/pcDNA3.1-SEMA3B质粒转染至Cos7细胞,400μg/ml G418筛选后建立稳定表达SEMA3B的Cos7细胞系.利用含有SEMA3B-Cos7细胞的培养上清液、特异性siRNA、实时定量PCR和蛋白免疫印迹方法,检测SEMA3B蛋白对Akt磷酸化及下游基因表达的影响及分子机制.结果:在细胞培养上清及细胞裂解液中稳定表达SEMA3B的Cos7细胞模型建立;利用含有SEMA3B蛋白的Cos7培养上清液及对照组培养上清液处理NCI-H1299细胞24小时后,含有SEMA3B蛋白组可显著降低H1299细胞内pAkt-ser473的蛋白表达及下游基因MDM2 mRNA表达,增加Caspase3 mRNA表达;特异性siRNA阻断IGFBP6表达,可部分消除SEMA3B抑制Akt磷酸化的作用,并影响其对MDM2和Caspase3的作用.结论:SEMA3B是通过IGFBP6介导其抑制Akt磷酸化作用及其下游基因表达,而发挥诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的作用,进一步提示在非小细胞肺癌中SEMA3B的抑癌作用及其潜在的治疗药物价值.