Peroxiredoxin-1基因沉默对转化生长因子β1促进肺成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

• 作者: 刘宝欣 刘英宇 孙影 杨方 梁婷婷 范玉磊 魏中秋
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 活性氧 转化生长因子-β1 胶原 Peroxiredoxin-1
• 年，卷（期）: 2016,（29）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4099-4102
• 页数: 4页
• 分类号: R563.9
• 字数: 4100字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2016.29.022

摘要

目的 探讨Peroxiredoxin-1 (Prx-1)基因沉默对转化生长因子β1(TGF-β1)促进肺成纤维细胞合成Ⅰ和Ⅲ型胶原的影响及其作用机制.方法 体外培养肺成纤维细胞分为4组:对照组(0.4％血清),TGF-β1组(5 μg/L),TGF-β1+阴性转染组(5μg/L TGF-β1+阴性对照siRNA),TGF-β1+ Prx-1 siRNA转染组(5 μg/L TGF-β1 +Prx-1 siRNA).利用脂质体Lipo2000将阴性对照siRNA和Prx-1 siRNA分别转染到TGF-β1+阴性转染组和TGF-β1+Prx-1 siRNA转染组的肺成纤维细胞中,转染48 h后用于后续实验.实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测转染后各组的Prx-1 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化Akt(p-Akt)及Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白水平,2,7-二氯荧光素二乙酸检测活性氧(ROS)水平.结果 (1) Prx-1 siRNA转染肺成纤维细胞后,TGF-β1+ Prx-1 siRNA转染组的Prx-1 mRNA表达明显降低.(2)与对照组比较,TGF-β1组Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及pAkt蛋白水平均明显增加(0.34±0.06 vs.0.58±0.06、0.42±0.05 vs.0.56±0.06、2 988±379 vs.4 315±580和0.29±0.05 vs.0.66±0.07,差异有统计学意义(P＜0.05).与TGF-β1组比较,TGF-β1+阴性转染组Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及p-Akt水平无明显变化(P＞0.05),但TGF-β1+ Prx-1 siRNA转染组Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及p-Akt蛋白水平均进一步增高(0.58±0.06 vs.0.79±0.09、0.56±0.06 vs.0.77±0.08、4 315±580 vs.5 841±782和0.66±0.07 vs.0.93±0.15,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成ROS,并由此促进Akt的激活和肺成纤维细胞合成Ⅰ和Ⅲ型胶原;而沉默Prx-1基因可激活ROS/Akt通路,从而有助于TGF-β1促进肺成纤维细胞合成胶原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙影	华北理工大学基础医学院病理学系	34	91	6.0	6.0
2	魏中秋	华北理工大学基础医学院病理学系	10	26	4.0	5.0
3	范玉磊	华北理工大学基础医学院病理学系	9	30	4.0	5.0
4	梁婷婷	华北理工大学基础医学院病理学系	8	30	4.0	5.0
5	杨方	华北理工大学基础医学院病理学系	19	45	4.0	5.0
6	刘宝欣	华北理工大学附属唐山市工人医院呼吸内科	2	9	2.0	2.0
7	刘英宇	华北理工大学附属唐山市工人医院呼吸内科	3	13	3.0	3.0