血清载脂蛋白B椭偏光蛋白质芯片技术定量检测的条件优化

• 作者: 宁翔 毕少杰 王娇娇 王娟 盛林
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 椭偏光蛋白芯片技术 光学蛋白质芯片 椭偏光生物显微成像技术 载脂蛋白B 载脂蛋白B抗体 蛋白G
• 年，卷（期）: 2016,（47）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: R446.11
• 字数: 4033字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.47.005

摘要

目的：优化椭偏光蛋白芯片技术定量检测血清载脂蛋白B（ApoB）的条件，并观察最佳条件下椭偏光蛋白芯片技术定量检测血清ApoB的准确性。方法用椭偏光蛋白芯片技术检测含有0．2、0．3、0．4、0．5、0．6 mg／mL的载脂蛋白B抗体（anti ApoB）和200μg／mL ApoB标准品的溶液，测得灰度值最高者选为最佳anti-ApoB浓度。用椭偏光蛋白芯片技术检测5、10、20、50、100、200μg／mL ApoB标准品溶液，anti- ApoB浓度为0．3 mg／mL，结果以灰度值表示。然后在上述标准品溶液中加入蛋白G使其终浓度为0．1 mg／mL，再检测一次灰度值。比较两次检测的灰度值，确定是否应该加入0．1 mg／mL蛋白G。最佳条件下椭偏光蛋白芯片技术检测0、5、10、20、50、100、200μg／mL ApoB标准品溶液，计算上述ApoB标准品溶液灰度值与不含ApoB的空白探针溶液（含anti ApoB和蛋白G）灰度值的差值。对上述ApoB标准品溶液浓度和灰度值差值的相关性进行分析，以ApoB标准品溶液浓度为横坐标，灰度值差值为纵坐标描画标准曲线并建立方程。最佳条件下用椭偏光蛋白芯片技术检测16份40倍稀释的已知ApoB浓度（采用免疫比浊法测定）血清的灰度值两次。用上述方程计算16份血清中ApoB浓度，并与其实际ApoB浓度比较。结果最佳anti-ApoB浓度为0．3 mg／mL。与不应用蛋白G者相比，应用0．1 mg／mL蛋白G的椭偏光蛋白芯片技术测得样品的灰度值高（P均＜0．05）。以ApoB浓度为横坐标x、灰度差值为纵坐标y描画标准曲线， Maple9．5软件得出的回归方程为：y＝－23．116Ln（1－x／60），R2＝0．9364。16份血清ApoB浓度和第一次、第二次用椭偏光蛋白芯片技术检测测得血清ApoB浓度相比P均＞0．05。结论椭偏光蛋白芯片技术检测血清ApoB的最佳条件为anti-ApoB浓度0．3 mg／mL，蛋白G浓度0．1 mg／mL。此条件下椭偏光蛋白芯片技术检测血清ApoB结果准确。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王娟		147	975	17.0	26.0
2	毕少杰		14	123	6.0	11.0
3	盛林		22	134	5.0	11.0
4	王娇娇		2	3	1.0	1.0
5	宁翔		2	8	1.0	2.0