细粒棘球绦虫乳酸脱氢酶B细胞表位的预测及鉴定

• 作者: 严萍 叶萍 张颋 徐斌 胡薇 莫筱瑾 詹若挺 闫帅
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细粒棘球绦虫 乳酸脱氢酶 B细胞表位 预测 诊断抗原
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 554-558
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3
• 语种: 中文

摘要

目的 预测及鉴定细粒棘球绦虫乳酸脱氢酶(Echinococcus granulosus lactate dehydrogenase,EgLDH)的B细胞表位,为研制敏感性和特异性强的棘球蚴病诊断方法奠定基础. 方法 通过ESPript 3.0在线网站和IEDB软件对EgLDH的二级结构、β转角、表面可及性、柔韧性、抗原性、亲水性、线性表位等参数进行预测,筛选出具有潜在优势的B细胞表位区域;选取合适的B细胞表位进行体外多肽段合成;通过ELISA方法对合成的B细胞表位进行诊断效能评价,分别检测棘球蚴病患者血清、囊尾蚴病患者血清和健康者血清,评价敏感性、特异性和交叉反应性.用囊液抗原作为对照. 结果 EgLDH二级结构中α螺旋占37.16％,β-折叠占9.67％,无规则卷曲占53.17％,存在4个跨膜区.筛选获得7个潜在的B细胞表位区域.体外合成了4个氨基酸长序列的B细胞表位PP-1 (215～228)、PP-2 (189～200)、PP-4 (79～89)和PP-7 (21 ～～33),ELISA结果显示,4个B细胞表位PP-1、PP-2、PP-4和PP-7对棘球蚴病患者血清的敏感性分别为52.9％ (18/34)、61.8％ (21/34)、82.3％ (28/34)和50％ (17/34),PP-4与PP-1、PP-2和PP-7的敏感性差异有统计学意义(x2=8.100、5.143、9.091,均P＜0.05),囊液抗原的敏感性为91.1％ (31/34),与PP-1、PP-2和PP-7的差异有统计学意义(x2=9.600、5.780、10.530,均P＜ 0.05),与PP-4的差异无统计学意义(x2=0.444,P＞ 0.05);对健康者血清的特异性分别为100％ (21/21)、100％ (21/21)、95％ (20/21)和95％ (20/21),囊液抗原的特异性为95％ (20/21),与PP-1、PP-2、PP-4和PP-7的差异无统计学意义;对囊尾蚴病患者血清的交叉反应性分别为:0、1/10、2/10和2/10,囊液抗原的交叉反应性为5/10. 结论 EgLDH的B细胞表位PP-4对棘球蚴病患者血清有较强的敏感性和特异性,有望成为潜在的诊断抗原.