成年小鼠原代皮肤成纤维细胞的分离培养及其生物学特性

• 作者: 吴思思 薛斯亮 陈雪梅
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 成年小鼠 原代皮肤成纤维细胞 酶消化法 组织块贴壁法
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 823-827,870
• 页数: 6页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 4438字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2017.06.021

摘要

目的:建立一种周期短、成本低的成年小鼠原代皮肤成纤维细胞分离培养方法,并探索其生物学特性.方法:取8～12周龄BALB/c小鼠背部、尾尖、耳部皮肤,配制2种血清的细胞培养液,采用组织块贴壁法、酶消化法、酶消化组织块贴壁法进行原代皮肤成纤维细胞的培养,通过显微镜观察比较原代细胞的数量、形态、培养周期及纯度;通过免疫荧光、CCK-8、UVB辐照、流式细胞术进行生物学特性鉴别.结果:背部皮肤组织块贴壁使用Gibco胎牛血清培养7d无细胞游出,CLARK特级胎牛血清细胞游出较多.背部皮肤经酶消化法得到细胞贴壁少;经组织块贴壁法细胞生长慢,培养周期长;酶消化组织块贴壁法细胞游出速度快、数量多、呈长梭形.尾尖取材量少,得到细胞少;耳部皮肤取材方便,但细胞纯度低.CCK8增殖曲线呈S型;相较于对照组,UVB辐照后细胞凋亡率增高17％.结论:CLARK特级胎牛血清、背部皮肤取材、酶消化组织块贴壁法是培养成年小鼠原代皮肤成纤维细胞最优的方案,可增加细胞得量、缩短培养周期,降低成本.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈雪梅	四川大学华西医院公共实验技术中心	17	49	5.0	6.0
2	薛斯亮	四川大学华西医院皮肤性病科	22	16	2.0	2.0
3	吴思思	四川大学华西医院公共实验技术中心	23	24	3.0	3.0