甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体制备及其初步应用

• 作者: 丁建祖 张儒轩 方迪 杨新燕 沃恩康 郭潮潭 陈帅帅
• 来源期刊: 国际流行病学传染病学杂志
• 关键词: 流感病毒A型 核蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 79-84
• 页数: 6页
• 字数: 3975字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4149.2017.02.002

摘要

目的 制备甲型流感病毒核蛋白(NP)单克隆抗体,为甲型流感病毒诊断试剂盒以及相关研究提供材料.方法 大肠埃希菌BL21 (DE3)表达NP作为免疫原,免疫Balb/c小鼠后取脾脏细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得阳性细胞株,注射小鼠腹腔得到单克隆抗体,纯化后进行Western印迹法、ELISA法、细胞免疫染色和荧光法、双抗夹心ELISA法确定NP抗体的生物学特性,探索应用范围.结果 从Western印迹法、ELISA和细胞免疫染色法的结果可得知,抗NP单克隆抗体可以与免疫原特异性结合,也可以与H1N1、H3N2亚型流感病毒的NP特异性结合,具备检测流感病毒的能力.双抗夹心ELISA法进一步提升了抗体对抗原的检测灵敏度至128 pg.同时,通过细胞免疫荧光法观察到抗体可在细胞内显示NP从细胞核扩散到细胞质的过程.结论 制备的抗体成功检测H1N1、H3N2两种亚型的流感病毒,可作为用于流感防治的流感病毒诊断试剂盒的材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沃恩康	浙江省医学科学院生物工程研究所	36	44	4.0	5.0
2	郭潮潭	浙江省医学科学院生物工程研究所	43	100	5.0	9.0
3	丁建祖	浙江省医学科学院生物工程研究所	29	148	7.0	11.0
4	陈帅帅	浙江省医学科学院生物工程研究所	6	3	1.0	1.0
5	杨新燕	浙江省医学科学院生物工程研究所	6	3	1.0	1.0
6	张儒轩	浙江省医学科学院生物工程研究所	6	3	1.0	1.0
7	方迪	浙江省医学科学院生物工程研究所	6	3	1.0	1.0