小鼠c-Myc基因的克隆表达及其纯化

• 作者: 何滔 周汝滨 庞实锋 张国平 曹定国 梁朋 王申 田海山 钟美娟 项丽
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: c-Myc基因 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 20-25
• 页数: 6页
• 分类号: Q789
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20170204

摘要

目的:克隆小鼠c-Myc基因,构建原核表达载体并对其进行蛋白表达及纯化.方法:以TetO-FUW-OSKM质粒为模板经PCR扩增c-Myc基因,再通过基因重组技术与pET-3C载体相连转化大肠杆菌DH5α.经抗性筛选,PCR鉴定阳性重组子,测序正确后,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE对重组蛋白进行鉴定分析.结果:DNA电泳结果证实PCR扩增产物与预期大小一致,DNA测序结果显示与GenBank公布的c-Myc基因序列一致,IPTG诱导SDS-PAGE电泳后,在分子量64kDa左右出现诱导后蛋白新增条带,与预测的c-Myc分子量大小一致.结论:成功地构建了pET3C-Myc原核表达载体,表达并纯化出了c-Myc蛋白,为今后研究c-Myc蛋白及相关蛋白诱导体细胞成多能干细胞打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田海山	温州医科大学药学院	8	15	3.0	3.0
2	项丽		1	2	1.0	1.0
3	王申	温州医科大学药学院	1	2	1.0	1.0
4	钟美娟		1	2	1.0	1.0
5	周汝滨		1	2	1.0	1.0
6	曹定国		1	2	1.0	1.0
7	梁朋		1	2	1.0	1.0
8	张国平		1	2	1.0	1.0
9	何滔		1	2	1.0	1.0
10	庞实锋		1	2	1.0	1.0