水稻OsDTH10基因CRISPR/Cas9编辑突变体的创建及功能分析

• 作者: 刘薇茵 孔晓聪 李莹莹 杨波 栾维江 熊炜 王荃 靳亚军
• 来源期刊: 天津师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻 OsDTH10 CRISPR/Cas9系统 表达分析
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 26-30,36
• 页数: 6页
• 分类号: Q943
• 字数: 3440字
• 语种: 中文

摘要

为了探究OsDTH10基因在水稻生长发育及开花中的作用,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对OsDTH10基因进行定向编辑.在OsDTH10基因的第4个外显子处设计sgRNA的靶位点,通过PCR扩增与OsU6SK空载体连接形成OsU6SK-sgRNA融合载体,再将获得的sgRNA和Cas9连接到植物双元载体pCAMBI 1300中,得到重组载体pCAMBI 1300-CRISPR/Cas9-OsDTH 10.利用农杆菌介导的植物转化法得到转基因植株,对其进行鉴定并测序.本研究共获得3个株系8株转基因植株,测序结果显示,2号株系的4株转基因植株由于发生了单碱基的插入,基因测序出现了套峰.田间表型观察发现,2号株系的4株T0代转基因植株抽穗期早于空载体对照,获得的T1代转基因植株抽穗期比对照的提早8d.这些结果表明,重组载体pCAMBI 1300-CRISPR/Cas9-OsDTH10成功实现了对水稻OsDTH10基因的定向编辑.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	栾维江	天津师范大学生命科学学院	16	41	4.0	5.0
2	靳亚军	天津师范大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0
3	李莹莹	天津师范大学生命科学学院	5	9	2.0	2.0
4	熊炜	天津师范大学生命科学学院	4	7	2.0	2.0
5	杨波	天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室	3	5	1.0	2.0
6	刘薇茵	天津师范大学生命科学学院	2	4	1.0	2.0
7	王荃	天津师范大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0
8	孔晓聪	天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室	1	1	1.0	1.0