南方水稻黑条矮缩病毒安徽分离物S5片段的克隆及S5-2基因的原核表达

• 作者: 单文书 夏伟伟 张享享 江彤 蒋西子
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 南方水稻黑条矮缩病毒 S5片段 S5-2基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 页码范围: 58-62
• 页数: 5页
• 分类号: S435.111.4
• 字数: 3727字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2017.01.010

摘要

【目的】探讨南方水稻黑条矮缩病毒( Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)安徽分离物( SRBSDV-AnHui-HN2)的遗传特性,并获得原核表达的P5-2蛋白。【方法】RT-PCR扩增SRBSDV S5片段,克隆、测序并进行序列分析。将S5-2基因插入原核表达载体,重组载体转化大肠埃希菌并用IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化融合蛋白,SDS-PAGE分析P5-2蛋白的表达情况。【结果】SRBSDV-AnHui-HN2 S5片段全长3167 bp,包含S5-2基因全长612 bp,编码204个氨基酸。序列比对结果显示,SRBSDV-AnHui-HN2 S5片段与其他SRBSDV分离物S5片段的序列相似性极高,达99．0%~99．7%,而与斐济病毒属( Fijivirus)其他成员S5片段的序列相似性较低,仅为38．0%~71．3%；构建的S5片段系统发育树表明SRBSDV和RBSDV聚成1个分支,其中6个SRBSDV分离物聚成1个亚分支。原核表达获得相对分子质量约为47000的重组蛋白,Western blot分析显示,GST单抗能够与重组融合蛋白发生特异性反应。【结论】SRBSDV各分离物之间亲缘关系非常近,而与Fijivirus其他成员亲缘关系较远,原核表达获得的融合蛋白为靶标蛋白。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江彤	安徽农业大学植物保护学院	62	201	6.0	10.0
2	张享享	安徽农业大学植物保护学院	7	6	1.0	2.0
3	蒋西子	安徽农业大学植物保护学院	5	2	1.0	1.0
4	单文书	安徽农业大学植物保护学院	3	1	1.0	1.0
5	夏伟伟	安徽农业大学植物保护学院	3	3	1.0	1.0