猪链球菌荧光定量PCR检测方法的建立及临床应用

• 作者: 张仲萍 杨治平 王仲兵 王治维 胡明明 雷宇平
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 荧光定量PCR 猪链球菌 检测 探针
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 84-87
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61
• 字数: 2722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.12.024

摘要

为快速诊断和检测猪链球菌病,根据GenBank中已登录的猪链球菌抗原基因保守区域序列,设计并合成特异性引物及Taqman探针,通过优化荧光定量PCR反应体系及扩增条件,构建了快速、准确检测猪链球菌的Taqman荧光定量PCR检测方法(Taqman FQ-PCR),测定了该方法的灵敏性、重复性和特异性,并对疑似猪链球菌临床感染样本进行了检测.结果显示:所建立的Taqman FQ-PCR方法检测灵敏度为1×102拷贝/μL;对3种不同浓度的猪链球菌重组质粒进行3次重复扩增,变异系数均小于3%,说明重复性好;特异性检测显示,只有猪链球菌样本的扩增曲线呈阳性反应,其他致病菌均无荧光信号;采用此方法,对30份临床疑似猪链球菌感染样本进行检测,发现有27份样本为阳性,比采用国标法检测得到的结果更加灵敏.结果表明,建立的FQ-PCR方法具有灵敏性高、重复性好、特异性强等特点,可用于猪链球菌的快速诊断和检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王仲兵		17	108	6.0	10.0
2	雷宇平		19	36	3.0	5.0
3	杨治平		6	5	2.0	2.0
4	张仲萍		10	20	2.0	4.0
5	王治维		3	3	1.0	1.0
6	胡明明		3	3	1.0	1.0