荧光定量PCR检测猪链球菌2型主要毒力因子方法的建立

• 作者: 凌淑萍 叶宇飞 吕燕 吴银良 许秀琴 赵健 陈国
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪链球菌2型 荧光定量PCR 毒力因子
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 138-140
• 页数: 3页
• 分类号: S852.6
• 字数: 2615字
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立荧光定量PCR检测猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)、溶菌酶释放蛋白(Muramidase-released protein,MRP)和胞外因子(Extracellular protein factor,EF)3种主要毒力因子的方法.[方法]根据cps2j、mrp和ef基因的基因序列,分别设计并合成3对引物及相应的Taqman探针,其中cps2j和mrp的5'端标记FAM荧光发射基团,ef的5'端标记HEX荧光发射基团,3种基因的3 '端都标记BHQ1淬灭荧光基团.通过优化反应体系和程序,建立了一种基于Taqman探针法的荧光定量PCR方法检测上述3种主要毒力因子,其中cps2j单独检测,mrp与ef的实行双重荧光PCR方法检测.[结果]cps2j、mrp和ef的最低检测限分别为12、51和51 CFU,灵敏度很高;与其他病原菌无交叉反应,重复性及特异性均较好;此外,整个检测过程在60 min内即可完成.[结论]该试验所建立的双重荧光定量PCR方法的敏感性、重复性及特异性均较好,可用于同时快速检测猪链球菌2型3种主要毒力因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许秀琴		28	77	5.0	8.0
2	吴银良		74	210	8.0	12.0
3	赵健		52	177	8.0	11.0
4	吕燕		27	71	4.0	7.0
5	陈国		51	167	7.0	11.0
6	凌淑萍		10	5	1.0	1.0
7	叶宇飞		21	101	6.0	10.0