AKT2在胶质瘤细胞中替莫唑胺化疗耐药的作用机制研究

• 作者: 卢亦成 崔勇 应奇 张风林 胡国汉 骆纯
• 来源期刊: 临床神经外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脑胶质瘤 AKT2基因 替莫唑胺
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 微侵袭神经外科专题
• 页码范围: 26-29
• 页数: 4页
• 分类号: R739.41
• 字数: 3209字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-7770.2017.01.007

摘要

目的：研究AKT2基因在U251细胞株中对替莫唑胺化疗耐药中的作用机制。方法体外将慢病毒介导的AKT2-shRNA表达载体转染胶质瘤U251细胞。应用细胞计数试剂盒（CCK8）法检测RNA干扰AKT2后U251细胞对替莫唑胺敏感性的变化情况。流式细胞仪测定沉默AKT2基因表达后各组细胞凋亡的改变情况。 AKT2-shRNA干扰胶质母细胞瘤细胞株U251的AKT2表达，进而采用Western blot实验方法，来进一步分析和评价AKT2与MDR-1、MRP-1、MGMT、bcl-2、caspase-3、P53等相关蛋白表达情况和相互调控关系。结果 CCK8法检测结果计算替莫唑胺对U251细胞的半数细胞抑制浓度（ IC50）从 U251空白对照组的（39．72±2．41）μg／ml、阴性对照组的（39．43±2．24）μg／ml降到（27．23±1．93）μg／ml，AKT2干扰组U251细胞对替莫唑胺药物的IC50值显著降低。流式细胞仪检测凋亡实验显示，与空白对照的U251细胞[调亡细胞（16．95±1．32）％]和转染阴性对照的U251胶质瘤细胞[调亡细胞（17．93±2．29）％]相比，转染 AKT2 shRNA的U251细胞中早期、晚期调亡细胞明显增加，总调亡细胞达（38．16±4．83）％，干扰组凋亡水平有显著性增强（P＜0．05）。 AKT2-shRNA干扰U251后其凋亡明显增加，Real-time PCR和蛋白印迹实验结果提示bcl-2、survivin、MGMT明显下调，而caspase-3、PTEN、P53、beclin-1明显上调。结论 AKT2可能参与调控bcl-2、caspase-3、P53、survivin、beclin1等凋亡自噬相关蛋白及DNA损伤修复蛋白MGMT的表达，从而介导胶质母细胞瘤细胞株U251对替莫唑胺化疗抵抗。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢亦成	第二军医大学附属长征医院神经外科	242	1130	13.0	23.0
2	骆纯	第二军医大学附属长征医院神经外科	70	317	9.0	13.0
3	胡国汉	第二军医大学附属长征医院神经外科	68	240	9.0	11.0
4	应奇	解放军第411医院神经外科	15	43	4.0	6.0
5	崔勇	解放军第411医院神经外科	20	68	4.0	7.0
6	张风林	解放军第411医院神经外科	5	10	1.0	3.0