白藜芦醇通过BRD4调控Wnt/β-catenin通路逆转胶质瘤细胞替莫唑胺耐药的机制研究

• 作者: 李振江 孙德超 孔晨旭 耿亚东 徐晨阳 丁炳谦
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 神经胶质瘤 抗药性，肿瘤 Wnt信号通路 β连环素 白藜芦醇 替莫唑胺 溴结合域蛋白4
• 年，卷（期）: 2023,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1043-1049,1050
• 页数: 7页
• 分类号: R739.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20220566

摘要

目的 探究白藜芦醇（RES）逆转胶质瘤细胞替莫唑胺（TMZ）耐药的作用是否与通过溴结合域蛋白4（BRD4）调控Wnt/β-链蛋白（β-catenin）通路有关。方法 取人神经胶质瘤TMZ低敏细胞株（U138）、高敏细胞株（U251）、耐药株（T98G），Western blot法检测3种细胞株中BRD4、Wnt3a、β-catenin、TMZ耐药蛋白（MGMT）蛋白表达。取T98G细胞株分为对照1组（添加100 μmoL/L TMZ）、RES1组（添加50 μmoL/L RES）、RES+TMZ（添加100 μmoL/L TMZ和50 μmoL/L RES）组，用CCK-8法、流式细胞术检测各组细胞增殖、凋亡情况；Western blot法检测各组BRD4、Wnt3a、β-catenin、MGMT蛋白表达。为分析BRD4过表达对TMZ耐药性的影响，在添加100 μmoL/L TMZ的基础上，转染BRD4过表达质粒（pcDNA BRD4）或加入50 μmoL/L RES分别作为pcDNA NC组、pcDNA BRD4组、RES2组、RES+pcDNA BRD4组。为验证BRD4对Wnt3a/β-catenin通路的调控作用，在添加100 μmoL/L TMZ的基础上，加入BRD4抑制剂JQ1和Wnt3a/β-catenin通路激活剂LiCl，分为对照2组、JQ1组、JQ1+LiCl组。将T98G细胞接种于裸鼠左肩胛区，给予RES、TMZ和（或）JQ1治疗，检测瘤体中Ki67，BRD4、MGMT及Wnt3a/β-catenin蛋白表达。结果 与U251细胞相比，U138、T98G中BRD4、Wnt3a、β-catenin及MGMT表达均依次升高（P<0.05）。与对照1组相比，RES干预可抑制T98G细胞BRD4、Wnt3a/β-catenin、MGMT蛋白表达及增殖，促进凋亡，逆转细胞的耐药性（P<0.05）。pcDNA BRD4可逆转RES的抗增殖、促凋亡等上述作用。BRD4抑制剂JQ1可抑制T98G细胞BRD4、Wnt3a/β-catenin、MGMT蛋白表达及增殖，促进凋亡（P<0.05）；LiCl可逆转JQ1的抗增殖、促凋亡作用。RES单独或与JQ1联合治疗，可激活TMZ对瘤体内Wnt3a/β-catenin通路、MGMT表达和细胞增殖的抑制作用（P<0.05）。结论 RES可能通过下调BRD4，进而抑制Wnt3a/β-catenin通路活化，实现对胶质瘤T98G细胞TMZ耐药性的逆转。