上调自噬抑制LPS诱导的小胶质细胞死亡

• 作者: 刘雪 李项瑞 熊利泽 石星星 韦秋凤
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: 小胶质细胞 LPS 自噬上调 存活
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 23-28
• 语种: 中文
• DOI: 10.16557/j.cnki.1000-7547.2017.01.004

摘要

目的:观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理后,N9细胞自噬水平的变化,并探究LPS刺激下不同自噬水平对N9细胞的损伤和存活的影响.方法:体外培养N9细胞,给予24 h LPS处理,免疫荧光(IF)检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)及溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)的表达,Western Blot检测LC3与Beclin1的表达.LPS处理后分别使用自噬诱导剂雷帕霉素(RAP)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)调节N9细胞自噬水平,Western Blot检测不同处理组自噬标记蛋白LC3、Beclin1的表达;使用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase)试剂盒、Cell Count Kit(CCK8)试剂盒检测细胞损伤及存活.结果:(1)LPS刺激造成N9细胞损伤,LDH释放量(113.6％±3.2％)较对照组(100.0％±3.9％)显著增加(P＜0.01),存活细胞数(69.8％±2.1％)较对照组(100.0％±3.9％)显著减少(P＜0.001);(2)与对照组相比,LPS显著上调N9细胞LC3以及Beclin1水平(P＜0.05)并同时上调LAMP2水平;(3) RAP上调LPS处理后N9细胞的自噬水平并减少小胶质细胞损伤(100.8％±2.3％),促进细胞存活(87.4％±5.7％)(P＜0.05).3-MA则抑制LPS处理后N9细胞自噬水平并降低细胞存活(60.6％±2.9％),而细胞损伤(123.2％±3.7％)与LPS组相比未见统计学差异;(4)RAP与3-MA分别促进或抑制LPS诱导的N9细胞自噬相关蛋白的表达(P＜0.05).结论:上调自噬水平减少LPS刺激诱导的N9细胞损伤,促进细胞存活.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊利泽	第四军医大学西京医院麻醉及围术期医学科	329	2888	26.0	40.0
2	李项瑞	第四军医大学西京医院麻醉及围术期医学科	5	20	3.0	4.0
3	韦秋凤	广西医科大学第一附属医院麻醉科	3	12	2.0	3.0
4	刘雪	第四军医大学西京医院麻醉及围术期医学科	4	9	2.0	2.0
5	石星星	第四军医大学西京医院麻醉及围术期医学科	2	8	2.0	2.0