石蒜碱通过TLR4/NF-κB途径抑制LPS诱导的原代小胶质细胞炎症反应

• 作者: 抗晶晶 曹翔
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 石蒜碱 小神经胶质细胞 脂多糖 Toll样受体4 NF-κB 炎症反应
• 年，卷（期）: 2022,（9）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 897-901
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.11985/20220323

摘要

目的 观察石蒜碱（LYC）对脂多糖（LPS）诱导的原代小胶质细胞炎症反应和表型变化的影响，并探讨其作用机制。方法 将培养的原代小胶质细胞分为对照组、LYC组（0.1、0.5、1和5 µmol/L LYC）、LPS组（0.1 mg/L LPS）和LPS（0.1 mg/L LPS）+LYC组（5 µmol/L LYC）。倒置显微镜观察细胞形态变化；流式细胞术检测原代小胶质细胞的纯度及LPS诱导原代小胶质细胞向两种表型转化的情况；CCK-8法检测细胞活性；实时荧光定量PCR（qPCR）检测白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）以及不同表型小胶质细胞表面标志物mRNA表达；Griess法检测一氧化氮（NO）含量；免疫印迹法检测细胞TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达情况。结果 原代小胶质细胞纯度达95%以上。对照组及各浓度LYC组细胞活性差异无统计学意义。后续实验以5 µmol/L的LYC为药物浓度。与LPS组相比，LPS+LYC组的阿米巴样小胶质细胞数量明显减少，IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达水平以及NO含量降低，CD86 mRNA表达水平和表型比例降低，CD206mRNA 表达水平和表型比例升高，TLR4 和 p-NF-κB p65 蛋白表达水平降低（P＜ 0.01）。结论 LYC通过TLR4/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的原代小胶质细胞炎症反应，并促进其向“抑炎型”极化。