烟草丛顶病毒RNA依赖RNA聚合酶(RdRp)介导的体外复制体系

• 作者: 于成明 刘珊珊 原雪峰 师科荣 王国鲁 王德亚 耿国伟 逯晓明
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草丛顶病毒 RNA依赖RNA聚合酶 体外复制
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 790-796
• 页数: 7页
• 分类号: S432.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000116

摘要

通过重叠PCR扩增得到烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)中国分离物RdRp的编码序列,构建以pMAL-C2X为基础载体的原核表达载体pMAL-TB-RdRp.0.5 mM IPTG诱导可特异性表达分子量约为120 kDa的MBP-RdRp融合蛋白.温度梯度实验显示,18℃下诱导表达的MBP-RdRp融合蛋白的可溶性比例较高,约17％;经亲和层析纯化的MBP-RdRp可特异性识别TBTV正链和负链的3'末端序列,催化体外复制;对正负链的3'末端的体外复制效率存在差别,识别负链3'末端的体外复制效率明显高于正链3'末端.本研究创建的TBTVRdRp介导的体外复制体系为进一步研究TBTV基因组复制调控奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于成明		7	7	1.0	2.0
2	师科荣		13	12	2.0	3.0
3	原雪峰		7	0	0.0	0.0
4	王国鲁		3	0	0.0	0.0
5	王德亚		4	0	0.0	0.0
6	刘珊珊		3	12	1.0	3.0
7	耿国伟		4	0	0.0	0.0
8	逯晓明		1	0	0.0	0.0