丙型肝炎病毒RNA聚合酶在HepG-2细胞的稳定表达及活性分析

• 作者: 吴晓玉 孔令保 熊舒珺
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒属 RNA聚合酶 HepG-2细胞 表达 活性
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 355-357
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 3015字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2010.03.005

摘要

目的:探讨丙型肝炎病毒RNA聚合酶(NS5B)在肝癌细胞株HepG-2的稳定表达与活性.方法:Sca I酶切合有丙型肝炎病毒NS5B基因的重组表达载体pcDNA-5B,线性化的pcDNA-5B通过脂质体介导转染HepG-2细胞,G418筛选转染细胞.阳性细胞经基因组PCR、RT-PCR和Western Blot鉴定.体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验鉴定稳定表达NS5B蛋白的RNA聚合酶活性.结果:NS5B基因可整合到转染的HepG-2细胞的染色体上,并能有效转录和表达.体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验表明稳定表达的NS5B在体外和细胞内均具备RNA依赖的RNA聚合酶活性.结论:肝细胞HepG-2可以稳定表达丙型肝炎病毒NS5B,且具备RNA依赖的RNA聚合酶活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴晓玉	江西农业大学生物科学与工程学院发酵应用技术南昌市重点实验室	50	367	9.0	17.0
2	熊舒珺	江西农业大学生物科学与工程学院发酵应用技术南昌市重点实验室	2	4	2.0	2.0
3	孔令保	江西农业大学生物科学与工程学院发酵应用技术南昌市重点实验室	24	47	3.0	6.0