摘要:
H4N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)对哺乳动物健康具有潜在威胁.为探究炎症相关细胞因子在H4N2亚型AIV致病过程中的作用,将106鸡胚半数感染量(fifty percent embryo infection dose,EID50)的P20和P50病毒经鼻腔感染BALB/C小鼠(Mus musculus),于感染后1、3、5d,利用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)和qRT-PCR对肺脏中抑炎细胞因子(白细胞介素2(interleukin-2,IL-2),IL-4,IL-10)、促炎细胞因子(IL-lp,IL-6,肿瘤坏死因子o(tumour necrosis factor-α,TNF-α))、单核细胞趋化蛋白1(mononuclear chemokine protein l,MCP-1)及干扰素α(interferon-α,IFN-α)、IFN-β、IFN-γ分别进行检测.ELISA检测结果发现,小鼠感染病毒后,IL-1β、IL-6、IL-10、MCP-1、IFN-y和TNF-α均出现不同程度的上调,而IL-2、IL-4、IFN-α/β均出现下调.P50组中IL-6在攻毒后第3天和第5天表达量极其显著高于P20组(P<0.001),IL-10表达变化不明显,但在攻毒后第5天表达量极其显著高于P20组(P<0.001),P20组中MCP-1攻毒后第3天和第5天的表达量均极其显著低于P50组(P<0.001),P50组的IFN-γ在第1、3、5天表达量极显著(P<0.01)或极其显著(P<0.001)高于P20组.qRT-PCR检测结果发现,P50组中IL-6的表达水平在第3天和第5天极显著高于P20组(P<0.01),而P20组与P50组的MCP-1和IFN-γ在转录水平没有统计学差异.为了验证IL-6的促炎症作用,在小鼠鼻腔感染P50病毒后,静脉注射抗IL-6中和抗体,结果表明,各组中IL-10、MCP-1和IFN-γ的表达水平均未表现统计学差异,且没有减轻炎症反应,未对小鼠产生保护作用.本研究表明H4N2亚型AIV对小鼠的致病性与炎症反应相关,但降低IL-6不能减轻炎症反应.研究结果为开发可以用于预防和控制A型流感病毒感染的候选药物提供依据.