松嫩盐单胞菌中Group 2mrp操纵子敲除及突变株耐盐碱分析

• 作者: 姜巨全 孙开福 张正来 杨立娜 陈金
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 松嫩盐单胞菌 Group 2型Mrp 基因敲除 耐盐碱
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 11-20
• 页数: 10页
• 分类号: Q933|Q751
• 字数: 6033字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2017.12.002

摘要

为分析编码多亚基钠／氢逆向转运蛋白Group 2型mrp(mrp2)操纵子耐盐碱能力,首先构建mrp2自杀质粒pK18mobsacB-mrp2-NcoI,电转化野生型菌株-松嫩盐单胞茵(Halomonas songnenensis)NEAU-ST10-39T,基于以上基因敲除原理获得mrp2敲除菌株.PCR验证及测序结果表明,成功获得mrp2敲除菌株,并将其命名为NEAU-ST10-39T-△mrp2.为进一步验证突变株正确性,构建重组穿梭载体pBBR1-MCS5-mrp2,转化敲除菌株NEAU-ST10-39T-△mrp2,获得转化子命名为NEAU-ST10-39T-△mrp2/pBBR1-MCS5-mrp2.耐盐碱测试显示,NEAU-ST10-39T-△mrp2/pBBR1-MCS5-mrp2表现出与野生型菌株类似耐盐碱能力,进一步证实敲除菌株NEAU-ST10-39T-△mrp2构建正确;随NaCl浓度和pH升高,敲除菌株NEAU-ST10-39T-△mrp2生长受到抑制,表明mrp2对宿主菌NEAU-ST10-39T在高盐碱条件下生长具有重要作用.电转化方法可避免pK 18mobsacB在三亲本接合过程中受体茵抗性筛选、突变株纯化弊端,简化质粒导入宿主程序;NEAU-ST10-39T-△mrp2成功构建为敲除盐单胞茵中其他耐盐碱基因和揭示该基因耐盐碱机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜巨全	东北农业大学生命科学学院	9	9	2.0	3.0
2	张正来	东北农业大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
3	孙开福	东北农业大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
4	杨立娜	东北农业大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
5	陈金	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0