黑曲霉ATCC1015催化16α,17α–环氧黄体酮11α–羟基化及相关P450基因诱导表达

• 作者: 刘晓光 林本凤 职亚飞 路福平
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 黑曲霉ATCC1015 11α–羟基化 16α,17α–环氧黄体酮 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 食品与生物技术
• 页码范围: 8-14
• 页数: 7页
• 分类号: Q781
• 字数: 5380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20160142

摘要

为了定向遗传改造黑曲霉菌种,研究了黑曲霉(Aspergillus niger)ATCC1015转化甾体16α,17α–环氧黄体酮活性.转化产物经过薄层层析(TLC)、高效液相色谱(HPLC)以及氢谱、碳谱分析最终确定为11α–羟基–16α,17α–环氧黄体酮.确定了黑曲霉ATCC101511α–羟基化活性受底物16α,17α–环氧黄体酮的诱导.鉴于真菌的甾体羟化酶属于细胞色素P450酶,从黑曲霉ATCC1015的P450(CYP)基因数据库中筛选出57个具有编码甾体羟化酶潜力的CYP基因;利用实时荧光定量PCR确定了2个受甾体底物高度诱导的候选目标甾体羟化酶基因AnA100和AnA154.分别构建了AnA100基因和AnA154基因的重组酿酒酵母菌株pYES2-AnA100和pYES2-AnA154,甾体转化结果显示重组酵母菌pYES2-An100能够转化16α,17α–环氧黄体酮生成11α–羟基–16α,17α–环氧黄体酮.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	路福平	天津科技大学生物工程学院	184	1421	20.0	27.0
2	刘晓光	天津科技大学化工与材料学院	15	16	3.0	3.0
3	林本凤	天津科技大学生物工程学院	1	2	1.0	1.0
4	职亚飞	天津科技大学生物工程学院	1	2	1.0	1.0