微流控聚合物链式反应芯片的多色荧光检测

• 作者: 刘勇 吴晓松 朱灵 朱灿灿 李志刚 赵俊
• 来源期刊: 光电子·激光
• 学科: 工学
• 关键词: 微流控芯片 聚合酶链式反应(PCR) 荧光检测 DNA检测
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 测量·监测
• 页码范围: 859-864
• 页数: 6页
• 分类号: TP391.4|TP394.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16136/j.joel.2017.08.0497

摘要

为了实现微流控芯片上多目标DNA片段的同时检测,建立了基于光棒匀光结构的微流控芯片多色荧光检测系统.根据微流控芯片中的聚合物链式反应(PCR)反应腔的特点,设计了基于超亮白光LED模组、光棒、二向色镜和CCD的正交型荧光检测系统.CCD可一次采集微流控芯片上所有PCR反应腔中的荧光信号,通过滤光片轮组合的变换,可实现多种荧光标记物的同时检测.采用荧光素钠溶液对激发光的均匀性进行了测试,激发产生的荧光图像均匀度达到93.99％,可满足微流控芯片上多反应腔同时检测的需求.同时,以pUC-18人工质粒DNA作为标准品,开展了微流控荧光PCR生物实验,对系统性能进行验证.实验结果表明:微流控PCR反应腔的DNA浓度变化与荧光信号的变化相一致,pUC-18样品的检测限达到0.05pg/uL,扩增效率为97.28％,熔解曲线显示无引物二聚体产生,特异性好,达到了商业化仪器的水平.