RIP3介导的坏死性凋亡在C57BL/6小鼠颅脑创伤模型中的作用

• 作者: 于泽奇 张赛 杨小飒 江继鹏 涂悦 程世翔 董晓煜 衣泰龙
• 来源期刊: 中华神经创伤外科电子杂志
• 关键词: 受体相互作用蛋白3 颅脑创伤 坏死性凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 277-283
• 页数: 7页
• 字数: 6073字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-9141.2017.05.006

摘要

目的 探讨受体相互作用蛋白3(RIP3)介导的坏死性凋亡在C57BL/6小鼠颅脑创伤(TBI)模型中的作用及其机制.方法 采用电子控制性皮质撞击仪(CCI),设定打击参数(速度5 m/s、时间120 ms、深度1 mm),对小鼠顶叶大脑皮质进行精确撞击,建立颅脑创伤模型.将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,每组20只:Ctrl组不予处理,Sham组仅开骨窗,TBI组CCI打击后原位注射4 μl的DMSO,GSK'872组CCI打击后原位注射4 μl的GSK'872.再采用改良型神经功能缺损评分(mNSS)量表评估小鼠颅脑创伤后损伤程度,脑干湿比重法检测颅脑创伤后脑水肿程度,HE染色法检测小鼠脑皮层及海马区损伤程度,以创伤后觉醒时间评价损伤后恢复情况, Western blot法检测RIP3/RIP1/混合连接激酶结构域样蛋白(MLKL)、Akt/p-Akt/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p-mTOR、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶8(Caspase-8)/X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、Caspase-1/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达变化.结果 与TBI组相比,GSK'872可明显降低mNSS评分 [1 d:(11.95±1.50)vs(13.05±1.82),t=2.084,P<0.05;3 d:(8.95±1.39)vs(11.00±2.10),t=3.634,P<0.01;5 d:(6.75±1.33)vs(8.90±1.52),t=4.759,P<0.01;7 d:(4.00 ±1.08)vs(7.15 ±1.09),t=9.200,P<0.01],同时可明显减轻脑水肿程度 [(77.91 ±0.84)% vs (80.34±0.94)%,t=8.692,P<0.01],减轻皮层及海马区损伤程度,并促进创伤后觉醒[(4.08±0.63)h vs (5.11±0.74)h,t=4.717,P<0.01].Western blot结果显示,与TBI组相比,应用GSK'872后能降低RIP3[(0.70±0.03)vs(1.04±0.04),t=13.051,P<0.01]、RIP1[(0.93±0.02)vs(1.16±0.03),t=11.203,P<0.01]、MLKL[(0.75±0.04)vs(1.03±0.03),t=9.873,P<0.01]、Akt[(0.55±0.04)vs(0.77±0.05),t=6.278, P<0.01]、p-Akt [(0.80±0.04)vs(0.99±0.04),t=6.217,P<0.01]、mTOR [(0.48±0.05)vs(0.90±0.05),t=10.608,P<0.05]、p-mTOR [(0.59±0.06)vs(1.00 ±0.05),t=9.144,P<0.01]、Caspase-1 [(0.80 ±0.04)vs (0.98 ±0.05),t=5.226,P<0.01]、NLRP3[(0.51 ±0.03)vs(0.89 ±0.03),t=15.590,P<0.01]、XIAP[(0.50 ± 0.03)vs(0.83±0.03),t=13.340,P<0.01] 蛋白表达,并可促进Caspase-8持续升高 [(0.83±0.03)vs (0.71±0.03),t=5.044,P<0.01],差异具有统计学意义.结论 RIP3介导的坏死性凋亡在小鼠颅脑创伤中起重要作用,应用GSK'872可减轻小鼠颅脑创伤后的损伤程度,提示RIP3有可能成为将来临床上治疗颅脑创伤新的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江继鹏		6	15	2.0	3.0
2	张赛		95	567	12.0	19.0
3	涂悦		55	284	10.0	15.0
4	衣泰龙		6	9	2.0	2.0
5	程世翔		16	68	5.0	8.0
6	于泽奇	武警四川总队成都医院外一科	1	0	0.0	0.0
7	杨小飒		5	6	1.0	2.0