RIP3介导的坏死性凋亡在HT-22细胞牵张损伤模型中的作用

• 作者: 于泽奇 张赛 杨小飒 江继鹏 涂悦 程世翔 董晓煜 衣泰龙
• 来源期刊: 中华神经创伤外科电子杂志
• 关键词: 颅脑创伤 牵张损伤 坏死性凋亡 受体相互作用蛋白3 GSK'872 HT-22细胞
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 159-165
• 页数: 7页
• 字数: 4990字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-9141.2017.03.008

摘要

目的 探讨受体相互作用蛋白3(RIP3)介导的坏死性凋亡在HT-22细胞牵张损伤模型中的作用及其机制.方法 将HT-22细胞接种在Bioflex培养板,采用细胞损伤控制仪(CIC),设定损伤参数(阀门压力30 PSI、气体脉冲压力3.5~4.5 PSI、气体脉冲时间50 ms),建立HT-22细胞牵张损伤模型.分别采用数字全息显微镜(DHM)、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒、流式细胞术、western blot法检测牵张损伤后6 h Ctrl组、CIC组、GSK'872组间细胞形态差异,LDH浓度变化,细胞周期分布,RIP3/受体相互作用蛋白1(RIP1)/混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)、Akt/p-Akt/mTOR/p-mTOR、Caspase-8/X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)蛋白表达变化.结果 与CIC组相比,应用GSK'872后细胞平均数量[(244.67±11.68)vs(190.67±15.28),t=4.865,P<0.01]、细胞平均面积[(260.14±16.81)μm2 vs(175.91±15.00)μm2,t=6.476,P<0.01]有所增加,细胞平均厚度有所减小[(6.12±0.47)μm vs(8.04±0.48)μm,t=4.942,P<0.01];LDH浓度有所下降[(222.74±11.06)ng/l vs(275.93±12.26)ng/l,t=5.581,P<0.01];细胞周期有所恢复[Sub-G1:(0.33±0.15)%vs(6.51±0.63)%,t=16.530,P<0.01;G0/G1:(46.67±2.96)%vs(33.04±7.07)%,t=3.085,P<0.05];能够降低RIP3[(0.73±0.04)vs(1.09±0.09),t=6.239,P<0.01]、RIP1[(0.75±0.05)vs(0.91±0.05),t=4.211,P<0.05]、MLKL[(0.56±0.03)vs(0.70±0.04),t=4.785,P<0.01]、Akt[(0.49±0.05)vs(0.77±0.05),t=6.763,P<0.01]、p-Akt[(0.88±0.05)vs(1.06±0.05),t=4.509,P<0.05]、mTOR[(0.81±0.02)vs(0.90±0.05),t=2.813,P<0.05]、p-mTOR[(0.65±0.05)vs(1.00±0.05),t=8.413,P<0.01]、XIAP[(0.50±0.05)vs(0.73±0.05),t=5.814,P<0.01]蛋白表达,并可促进Caspase-8蛋白表达持续升高[(0.96±0.05)vs(0.75±0.05),t=5.351,P<0.01],差异具有统计学意义.结论 RIP3介导的坏死性凋亡在HT-22细胞牵张损伤模型中起到重要作用,应用GSK'872可减轻HT-22细胞牵张损伤的程度,提示RIP3有可能成为将来临床上治疗颅脑创伤新的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于泽奇		8	38	4.0	6.0
2	江继鹏		6	15	2.0	3.0
3	张赛		95	567	12.0	19.0
4	涂悦		55	284	10.0	15.0
5	衣泰龙		6	9	2.0	2.0
6	程世翔		16	68	5.0	8.0
7	杨小飒		5	6	1.0	2.0