TNF-α诱导MLO-Y4细胞发生RIP3介导的程序性坏死

• 作者: 孟志斌 崔红旺 朱永俊 祝开忠 赵志荣 黄涛
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤坏死因子α 程序性坏死 受体相互作用蛋白3 MLO-Y4细胞
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1499-1505
• 页数: 7页
• 分类号: R681
• 字数: 5621字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.08.025

摘要

目的: 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)能否诱导小鼠长骨骨样细胞株MLO-Y4发生程序性坏死及其发生机制.方法: 将MLO-Y4细胞分为正常对照(control)组、TNF-α处理组、TNF-α+necrostatin-1 (Nec-1)处理组、TNF-α+Z-VAD处理组和TNF-α+受体相互作用蛋白3(RIP3)-siRNA组.用流式细胞术检测各组细胞凋亡或坏死率,透射电镜鉴定细胞形态学变化,用Western blot法测定RIP1、RIP3和cleaved caspase-3的蛋白水平,应用激光共聚焦显微镜观察RIP1和RIP3蛋白的共表达,应用荧光标记法检测各组细胞活性氧(ROS)水平.结果: TNF-α诱导MLO-Y4细胞24 h,凋亡和坏死率明显高于control组(P<0.01).与TNF-α组相比,Nec-1、Z-VAD和RIP3-siRNA均能降低细胞的凋亡或坏死率(P<0.01).在TNF-α组可见大量坏死样细胞,在Z-VAD组仍可见到坏死样细胞,而在Nec-1和RIP3-siRNA组未见到坏死样细胞.Western blot实验结果显示Nec-1可有效抑制RIP1蛋白表达,而Z-VAD对RIP1和RIP3蛋白表达无影响,RIP3-siRNA可有效降低RIP3蛋白表达(P<0.01).与TNF-α组比较,Nec-1可有效降低RIP1-RIP3蛋白共表达阳性细胞百分率(P<0.01),而Z-VAD对其无影响.与control组相比,TNF-α组的ROS水平明显增高(P<0.01);与TNF-α组相比,Nec-1、Z-VAD及RIP3-siRNA均能有效抑制ROS水平(P<0.01).结论: TNF-α能诱导MLO-Y4细胞发生RIP3介导的程序性坏死;ROS可能是MLO-Y4细胞程序性坏死的执行者.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟志斌	海南医学院第一附属医院脊柱骨病外科	85	324	8.0	13.0
2	黄涛	海南医学院第一附属医院脊柱骨病外科	22	87	4.0	8.0
3	崔红旺	海南医学院第一附属医院脊柱骨病外科	8	10	2.0	3.0
4	祝开忠	海南医学院第一附属医院脊柱骨病外科	3	12	2.0	3.0
5	朱永俊	海南医学院第一附属医院肾病风湿科	7	44	4.0	6.0
6	赵志荣	海南医学院第一附属医院脊柱骨病外科	1	2	1.0	1.0