TNF-α在调控高糖诱导肾小管上皮细胞程序性坏死过程中的作用

• 作者: 孟立峰 官颖
• 来源期刊: 浙江临床医学
• 关键词: 糖尿病肾病 程序性坏死 肿瘤坏死因子-α
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1401-1403
• 页数: 3页
• 语种: 中文

摘要

目的 探究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在高糖诱导的肾小管上皮细胞(NRK-52E)程序性坏死过程中的调控作用.方法 将NRK-52E根据不同的处理方法随机分为4组:正常对照组、TNF-α抑制剂处理组、糖尿病肾病组、TNF-α抑制剂处理的糖尿病肾病组.通过向体外培养的NRK-52E内加入含30mmol/L葡萄糖的DMEM高糖培养基构建糖尿病肾病细胞模型.TNF-α抑制剂处理组细胞在给予含30mmol/L葡萄糖的DMEM高糖培养基处理前1h,向培养基内加入TNF-α抑制剂Lenalidomide处理.培养48h后收集培养皿中的NRK-52E及细胞上清液.通过MTS试剂盒检测各组细胞活性改变;通过细胞凋亡与坏死检测试剂盒检测各组细胞凋亡与坏死情况;通过酶联免疫吸附双联抗体夹心法(ELISA)检测各组细胞上清液中TNF-α表达水平;通过Western?blot实验检测各组细胞内TNF-α、RIP1、RIP3和MLKL蛋白表达水平.结果 与正常对照组比较,给予含30mmol/L葡萄糖的DMEM高糖培养基处理可显著上调NRK52E凋亡和坏死水平;上调细胞上清液中及细胞内TNF-α表达水平;上调细胞内程序性坏死相关蛋白RIP1、RIP3和MLKL蛋白表达水平.与糖尿病肾病组比较,给予TNF-α抑制剂处理可显著下调NRK52E凋亡和坏死水平;下调细胞上清液中及细胞内TNF-α表达水平;下调细胞内程序性坏死相关蛋白RIP1、RIP3和MLKL蛋白表达水平.结论 在高糖诱导的NRK52E早期损伤过程中,抑制TNF-α蛋白表达水平可延缓NRK52E程序性坏死过程.本研究结果可以为糖尿病肾病的临床治疗提供理论依据.