PI3 K在肿瘤坏死因子诱导L929细胞程序性坏死过程中的调控作用研究

• 作者: 于继云 常喜喜 张毅 杜芝燕 武帅 王丽丽 王宇 王籽橙 胡世平 陈国柱
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 磷脂酰肌醇3-激酶 肿瘤坏死因子α 细胞程序性坏死 蛋白激酶B 混合系激酶区域样蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 25-32
• 页数: 8页
• 分类号: Q255|R730.2
• 字数: 6186字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2017.01.007

摘要

目的：探讨磷脂酰肌醇3-激酶（ phosphatidylinositol-3-kinase， PI3K）在肿瘤坏死因子α（ tumor necrosis factor alpha， TNFα）诱导细胞程序性坏死过程中的调控作用与机制。方法利用慢病毒介导的RNA干涉技术构建PI3K催化亚基p110α敲低、RIP1敲低及RIP1与p110α双敲低的L929细胞株，Western印迹或RT-PCR验证敲低效果。同时，利用Western印迹检测AKT和混合系激酶区域样蛋白（ MLKL）磷酸化及MLKL多聚化。流式细胞术和显微拍照术检测细胞死亡。结果 PI3K和AKT抑制剂及p110α敲低都可降低AKT磷酸化水平，并阻断TNFα诱导的L929细胞程序性坏死。敲低RIP1并不抑制TNFα与Z-VAD联合诱导的L929细胞程序性坏死，但这种RIP1非依赖性细胞程序性坏死能为p110α敲低抑制。此外，p110α敲低可抑制TNFα与Z-VAD联合诱导的MLKL活化及其介导的细胞程序性坏死。结论 PI3K是调控细胞程序性坏死的重要靶点，可通过RIP1依赖及非依赖性方式激活，进而活化AKT与MLKL，启动TNFα诱导的细胞程序性坏死。