串联鹿茸多肽基因在单一蛋白生产系统中的表达

• 作者: 刘畅 唐小雨 潘宇铭 王程 许文豪 郑红鹤
• 来源期刊: 吉林医药学院学报
• 关键词: 鹿茸多肽 串联重复 单一蛋白生产
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 411-414
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 利用单一蛋白生产(SPP)系统可溶性表达串联鹿茸多肽(AP).方法 设计并合成由凝血酶Ⅹa序列间隔的5倍串联AP基因(5×AP),并将其克隆至冷休克表达载体中构建pColdⅡ(sp-4)-5×AP质粒,然后与pMazF质粒共转化入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中建立SPP系统,表达后经凝血酶Ⅹa水解获得AP.结果 5倍串联AP基因的碱基数为570 bp,在30℃下利用1 mol/L IPTG诱导表达的串联AP的分子量为18500,水解后获得的AP的分子量为3700.结论 利用SPP系统可成功表达纯度较高的串联AP,并可被凝血酶Ⅹa水解获得AP,为进一步研究基因工程方法制备AP的生物学性质奠定基础.