通过环介导恒温扩增技术检测空肠弯曲杆菌

• 作者: 孙刚 李博星 李环 林维石 程伟伟 袁静 赵向娜 陆静 陈俊 马艳艳 魏晓 黎尔纳 齐诗蕊
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: hipO基因 DNA介导恒温核酸扩增法 快速检测 空肠弯曲杆菌
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 306-309,317
• 页数: 5页
• 分类号: R446.5|R378.2
• 字数: 3809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2017.04.014

摘要

目的 建立基于DNA环介导恒温核酸扩增法(LAMP)快速检测空肠弯曲杆菌.方法 以空肠弯曲杆菌马尿酸酶基因(hipO基因)为靶序列,设计6套特异性引物进行LAMP反应,通过比较扩增效率筛选出最佳引物用以快速检测空肠弯曲杆菌.对检测方法的特异性进行验证,敏感性与PCR法比较.结果 实时浊度仪监测反应结果表明,LAMP反应在62℃恒温条件60 min 内完成;如果在反应前添加钙黄绿素与氯化锰混合液(FD),黄绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果.LAMP法最低检出限为6.97×102拷贝/μl,敏感性为PCR法(6.97×103拷贝/μl)的10倍.结论 LAMP法用于快速检测空肠弯曲杆菌具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果判读方便、敏感性高、特异性强等特点,特别适于现场和基层检疫及医疗机构快速诊断.