高致病性A(H5N8)亚型禽流感病毒NA基因核酸检测方法的建立

• 作者: 张烨 李晓丹 杨磊 王大燕 舒跃龙 薄洪
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 流感 A(H5N8) 实时荧光逆转录聚合酶链式反应(Real-time RT-PCR)
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 诊断检测方法研究论著
• 页码范围: 457-461
• 页数: 5页
• 分类号: R373.1
• 语种: 中文

摘要

建立以Real-time PCR为基础的新型高致病性A(H5N8)亚型禽流感病毒NA基因检测方法.针对2016年6月起频繁暴发的H5N8禽流感疫情,从GenBank和Global Initiative on Sharing All Influenza Data(GISAID)下载2014年以来的H5N8亚型禽流感病毒的NA序列,通过序列比对,在相对保守区域设计适用于实时荧光逆转录聚合酶链式反应(rRT-PCR)的引物和探针.选用28株不同NA亚型的流感病毒进行特异性验证,结果显示本文设计的引物探针组合能够特异性检测高致病性H5N8亚型禽流感病毒的NA基因.灵敏度检测结果显示,本文设计的引物探针组合能检出最低23个拷贝的RNA.本文建立了高致病性H5N8亚型禽流感病毒NA基因特异性荧光定量检测方法,与世界卫生组织(WHO)推荐的A型流感病毒M基因、H5基因检测引物探针的最低检测限一致,可以组合用于H5N8亚型禽流感病毒的检测.