噬菌体基因组DNA快速提取方法

• 作者: 云龙 刘秋婷 田雨顺 罗鹏 胡超群
• 来源期刊: 热带生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 噬菌体基因组DNA 快速提取方法 核酸降解 噬菌体粒子沉淀
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 232-235
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2940字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2017.02.018

摘要

针对传统噬菌体基因组DNA的提取方法缺乏广泛适用性,并且提取中用到酚/氯仿抽提,操作步骤繁琐,会对操作人员身体造成一定程度的损伤等不足,笔者建立了1种噬菌体基因组DNA快速提取方法.其提取的主要步骤包括宿主核酸降解、噬菌体粒子沉淀、噬菌体DNA释放、杂质去除、DNA吸附、DNA清洗和DNA洗脱等.结果表明,通过此法能快速提取以溶藻弧菌、大肠杆菌和阴沟肠杆菌为宿主菌的多种噬菌体基因组DNA,最快可以在2h内完成,而且提取的产量和纯度均较高,DNA浓度超过100 ng·μL-1,OD260/280达到1.8以上,提取产物不受宿主菌基因组DNA污染,可用于下游的实验分析.