MiR-155与KLF4的靶向结合对肾小管上皮细胞MMPs表达的影响

• 作者: 宁雅娴 王俭勤 王晓元
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 慢性肾功能不全 微小RNA155 Kruppel样因子4 基质金属蛋白酶
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 197-202
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

目的 研究miR-155是否通过下调靶基因Kruppel样因子4(KLF4)影响肾小管上皮细胞中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和MMP-9的表达.方法 首先验证miR-155是否可以抑制肾小管上皮细胞中MMPs的表达和活性及其对KLF4表达影响:miR-155-mimic、miR-155 mimic-对照(空质粒)、空白培养基转染离体培养的肾小管上皮细胞,6h后,荧光定量RT-PCR检测miR-155表达,免疫印迹试验(Western blot)检测细胞MMP-2、MMP-9、KLF4的表达,明胶酶谱检测细胞中MMP-2和MMP-9的活性.生物信息学预测miR-155潜在靶基因为KLF4后,验证miR-155是否是通过靶向抑制KLF4发挥其作用:肾小管上皮细胞用过表达miR-155的质粒转染后,再进一步转染KLF4过表达质粒或空质粒,6h后Western blot和明胶酶谱法再次检测上述指标.另取细胞,分别构建包含KLF4-3'UTR野生型和突变型序列的荧光素酶质粒,与miR-155-mimic或者空质粒对照共转染肾小管上皮细胞,24 h后荧光素酶试验检测miR-155对KLF4基因的靶向抑制.结果 相比转染miR-155 mimic-对照的细胞,转染了niR-155-mimic的细胞miR-155表达上调,KLF4的表达受到抑制,MMP-2、MMP-9的表达和活性下降.相比于转染miR-155质粒和转染miR-155+空质粒,转染过表达KLF4+ miR-155质粒的细胞KLF4表达上调,MMP-2、MMP-9的表达和活性增加.荧光素酶试验验证miR-155可与KLF4靶向结合.结论 MiR-155可以通过靶向作用下调KLF4,从而抑制肾小管上皮细胞中MMP-2、MMP-9的表达和活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宁雅娴	兰州大学第二医院肾内科	9	46	3.0	6.0
2	王俭勤	兰州大学第二医院肾内科	78	353	10.0	16.0
3	王晓元	兰州大学第二医院风湿科	20	105	6.0	10.0