不结球白菜BcOPR3基因的克隆与功能分析

• 作者: 侯喜林 文锴 李英 王远 胡蝶 袁敬平
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 不结球白菜 BcOPR3 克隆 亚细胞定位 RT-qPCR
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 804-811
• 页数: 8页
• 分类号: S634.3
• 字数: 5289字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201612018

摘要

[目的]12-氧-植物二烯酸还原酶(12-oxo-phytodienoic acid reductase,OPR)是茉莉酸生物合成途径的关键酶,催化12-氧-植物二烯(OPDA)还原反应生成茉莉酸化合物,广泛参与植物生长过程中的防御系统.本文旨在克隆和研究不结球白菜BcOPR3基因,研究其对信号分子和非生物胁迫应答的影响.[方法]对不结球白菜OPR3基因进行克隆、生物信息分析、亚细胞定位,并对其在霜霉病菌、脱落酸(ABA)、茉莉酸(JA)、水杨酸(SA)、机械伤害、低温和热激胁迫下的表达水平进行了分析.[结果] BcOPR3在2个不结球白菜品种中的序列一致,其BcOPR3蛋白与同科油菜(Brassica napus)的同源性高达98％,进化关系与之最相近;亚细胞定位结果显示BcOPR3定位在细胞膜上;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测结果表明,不结球白菜霜霉病菌、ABA、JA、SA、机械伤害、低温和热激胁迫均能诱导BcOPR3基因表达.霜霉病菌侵染下,BcOPR3在抗性自交系‘苏州青’和感病自交系‘矮脚黄’中存在差异表达,并且在抗病自交系中表达量较高.[结论]从不结球白菜克隆得到的BcOPR3,通过表达分析发现,BcOPR3可能存在对非生物胁迫的共响应,且在不结球白菜中该基因是在细胞膜上起作用.在非生物胁迫下,基因具有不同的应答模式,抗性自交系BcOPR3基因的高表达是其具有更高抗性的主要原因.