不结球白菜BcCNL基因的克隆及功能分析

• 作者: 侯喜林 俞静 刘唱 刘海龙 张昌伟 李燕 李英 杨洋
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 不结球白菜 BcCNL RT-qPCR 亚细胞定位 病毒诱导基因沉默(VIGS)
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 植物科学
• 页码范围: 229-235
• 页数: 7页
• 分类号: S634.3
• 字数: 4230字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201803048

摘要

[目的]CC-NBS-LRR(卷曲螺旋-核苷酸结合位点-富含亮氨酸重复,CNL)是高度保守的植物抗病蛋白家族.本文旨在克隆和研究CNL基因在不结球白菜抗霜霉病中的作用.[方法]以‘苏州青’cDNA为模板克隆获得BcCNL基因全长,并进行生物信息学分析、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测、亚细胞定位及病毒诱导基因沉默(VIGS)验证.[结果]BcCNL基因含有2 790 bp开放阅读框,编码929个氨基酸,蛋白质相对分子质量为226.7,等电点为2.7.系统进化树结果显示,不结球白菜BcCNL蛋白与野甘蓝的进化关系最近,含有RX-CC、NB-ARC和LRR-3结构域;亚细胞定位显示其定位于细胞膜上.霜霉菌侵染后,BcCNL基因在抗病品种‘苏州青’中的表达量高于感病品种‘矮脚黄’;BcCNL基因的沉默降低了‘苏州青’对霜霉病的抗性.[结论]BcCNL蛋白在进化过程中保守性较高,定位于细胞膜上,BcCNL基因的沉默降低了‘苏州青’对霜霉病的抗性.