不结球白菜调控开花时间候选基因BcVIL1的克隆与表达分析

• 作者: 侯喜林 申浩冉 肖栋
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 不结球白菜 BcVIL1 克隆 基因表达 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 植物科学
• 页码范围: 825-831
• 页数: 7页
• 分类号: S634.3
• 字数: 5301字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201711011

摘要

[目的]本文旨在克隆和研究不结球白菜BcVIL1基因在春化过程中的表达情况,初步了解不结球白菜BcVIL1基因的结构及功能.[方法]以普通白菜PC-175和菜心‘CX-49’为试验材料,利用RT-PCR技术克隆BcVIL1基因全长,并采用生物信息学方法进行氨基酸序列比对和进化分析.通过实时荧光定量PCR (RT-qPCR)技术分析2种材料春化过程中BcVIL1的表达情况.构建亚细胞定位载体pEZS-NL-BcVIL1,利用亚细胞定位技术,分析BcVIL1基因在真核细胞中表达的位置.[结果]2种材料中BcVIL1基因序列基本一致,开放阅读框为1 020 bp,编码339个氨基酸.进化分析表明:Bc VIL1基因与大白菜进化关系最近,同源性最高(99％).在PC-175中,春化处理7d就可以诱导BcVIL1基因的表达,且在整个春化过程及春化之后都有较高的水平表达,而在‘CX-49’中,BcVIL1基因在春化过程中的表达与未春化处理相比无显著差异.亚细胞定位结果表明:BcVIL1主要在细胞核与细胞膜上表达.[结论]BcVIL1基因在春化过程中其表达具有品种特异性,且在不结球白菜中该基因主要在细胞核与细胞膜上发挥作用.