慢病毒介导CX43基因修饰小鼠骨髓间充质干细胞体系的建立及鉴定

• 作者: 司英健 封志纯 王亚萍 王洋 王艳 邢国胜
• 来源期刊: 中国小儿血液与肿瘤杂志
• 关键词: 骨髓间充质干细胞,小鼠 间隙连接蛋白43 慢病毒 转染
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 123-130
• 页数: 8页
• 字数: 5196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5323.2017.03.003

摘要

目的 建立慢病毒介导间隙连接蛋白43(CX43)基因修饰小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体系并进行鉴定,为研究CX43过表达BMSCs在移植物抗宿主病中的作用奠定实验基础.方法 采用全骨髓贴壁分离培养法获取小鼠BMSCs,流式细胞术检测细胞表面标志和成骨、成脂、成内皮细胞诱导分化能力;重组慢病毒载体pHBLVTM-CX43-GFP、pHBLVTM-GFP转染BMSCs,未转染慢病毒的BMSCs为空白对照,应用细胞免疫荧光、免疫组化法和Western blot方法检测各组CX43的表达.结果 流式细胞术检查示BMSCs表达CD73,CD44,CD29和CD90,不表达CD34,CD105;成骨诱导21d茜素红染色呈红色结节,成脂诱导分化14d可见明显脂滴并油红染色阳性,成内皮细胞诱导分化21d免疫荧光示内皮细胞标识CD31,CD34表达明显增加,接种于Matrigel基底胶上具有成小管能力;免疫荧光、免疫组化和Western blot方法均显示CX43基因修饰的BMSCs 的CX43蛋白表达明显增加.结论 成功建立了小鼠BMSCs分离培养法和CX43基因体外转染BMSCs体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	封志纯		24	53	4.0	6.0
2	王亚萍	山西医科大学陆军总医院临床医学院	6	1	1.0	1.0
3	王洋		2	18	1.0	2.0
4	司英健		1	1	1.0	1.0
5	王艳		1	1	1.0	1.0
6	邢国胜		2	5	1.0	2.0