肠上皮细胞损伤模型中细胞自噬对Caco-2细胞紧密连接蛋白表达的影响

• 作者: 姜英健 张佃良 李洪波 温伟伟 郑红梅
• 来源期刊: 齐鲁医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肠黏膜 自噬 紧密连接蛋白质类 Caco-2细胞
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 185-188
• 页数: 4页
• 分类号: R333.5|R329.25
• 语种: 中文
• DOI: 10.13362/j.qlyx.201702016

摘要

目的 探讨脂多糖(LPS)诱导肠上皮细胞损伤模型中,肠上皮细胞自噬对肠上皮Caco-2细胞紧密连接(TJ)蛋白表达的影响.方法 在人肠癌细胞系Caco-2细胞中建立LPS诱导肠上皮细胞损伤模型,细胞分为空白对照组(A组)、单独的LPS处理组(B组)、LPS+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(C组).以电阻仪分别检测3组Caco-2细胞跨上皮电阻(TER)值;通过检测荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(FITC-dextran)透过率,分别观察3组细胞的细胞间通透性;以Western blot方法检测3组细胞自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、肠上皮细胞TJ蛋白Zonula occluden-1(ZO-1)、claudins-2(CL-2)、occludin(OC)的表达水平;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测肠上皮细胞CL-2、ZO-1和OC mRNA表达.结果 C组在各时点TER值较A、B组明显降低(F=83.82～271.83,P＜0.05);C组细胞间FITC-D4的透过率高于A、B组(F=724.92,P＜0.05);C组的LC3Ⅱ蛋白表达低于A、B组(F=134.72,P＜0.05);C组与B组相比CL-2蛋白表达增加,ZO-1和OC蛋白表达降低,差异均有统计学意义(F=90.03～329.08,P＜0.05);RT-PCR检测结果显示,C组CL-2 mRNA较B组表达增加,而ZO-1和OC mRNA表达降低,差异均有统计学意义(F=339.81～580.32,P＜0.05).结论 在LPS诱导肠上皮细胞损伤模型中,肠上皮细胞自噬可能降低肠上皮细胞CL-2表达,提高ZO-1和OC表达,以此维持肠上皮细胞TJ作用,从而保护肠上皮屏障.