丝裂原活化蛋白激酶信号通路在氯乙酸诱导人支气管上皮细胞凋亡中的作用

• 作者: 于功昌 孟涛 戴宇飞 李云霞 杨墨 贾强
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 氯乙酸 丝裂原活化蛋白激酶 上皮细胞
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 321-327
• 页数: 7页
• 字数: 6770字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2017.05.001

摘要

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在氯乙酸诱导的人正常支气管上皮细胞16HBE凋亡过程中的作用.方法 用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L氯乙酸处理16HBE细胞24 h后,应用CCK-8和LDH法检测细胞存活情况,采用 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,并用免疫印迹法检测MAPK信号通路蛋白p38、ERK1/2、JNK的磷酸化.用MAPK通路特异性抑制剂(SB203580、U0126、SP600125)预处理16HBE细胞1h,再用2.5 mmol/L氯乙酸染毒24 h后,检测加入抑制剂后p-p38、p-ERK1/2、p-JNK的表达水平及细胞活力和凋亡的变化.结果 随着氯乙酸染毒浓度的增加,用CCK-8法和LDH法检测的细胞存活率逐渐降低,相关系数分别为-0.902和-0.825(P＜0.05),均具有较好的剂量效应关系,且CCK-8法检测效能明显优于LDH法,差异有统计学意义(P＜0.05).氯乙酸可诱导16HBE细胞凋亡,1.5、2.0、2.5 mmol/L氯乙酸所致细胞凋亡率分别为17.2％±4.0％、24.6％±4.2％和39.3％±5.7％,均明显高于对照组(5.6％±3.0％),差异有统计学意义(P＜0.05).氯乙酸染毒组p38和ERK1/2蛋白磷酸化水平存在时间、剂量依赖性关系;与对照组比较,16、24 h组p-p38蛋白水平分别是对照的2.1和2.6倍,差异有统计学意义(P＜0.01),p-ERK1/2蛋白水平分别比对照降低了37％和52％,差异有统计学意义(P＜0.05),而p-JNK蛋白各时间点均无明显变化;染毒24h后,2.0、2.5 mmol/L组p-p38蛋白水平分别是对照组的1.9和2.6倍,差异有统计学意义(P＜0.01),p-ERK1/2蛋白水平分别比对照组降低了40％和50％,而JNK蛋白各组未见明显磷酸化.与对照组和氯乙酸染毒组比较,抑制剂对照组和抑制剂组p-p38、p-ERK1/2及p-JNK蛋白均明显减少;与对照组比较,氯乙酸染毒组和p-38、ERK及JNK通路抑制剂组细胞活力分别下降了28％、18％、36％和26％,凋亡率分别为对照组的7、4、8和7倍,差异有统计学意义(P＜0.01);与氯乙酸染毒组比较,SB203580组细胞活力增加了14％,U0126组降低了11％,差异有统计学意义(P＜0.05),SB203580组细胞凋亡率下降了36％,U0126组上升了18％,差异有统计学意义(P＜0.05),SP600125组未见明显变化.结论 氯乙酸能激活p38 MAPK信号通路而抑制ERK1/2信号通路,且p38通路的激活和ERK1/2通路的失活参与氯乙酸诱导的16HBE细胞凋亡过程,而JNK信号通路未参与氯乙酸所致16HBE细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟涛	中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学污染与健康安全重点实验室	4	12	2.0	3.0
2	李云霞	中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学污染与健康安全重点实验室	3	49	2.0	3.0
3	贾强	山东省医学科学院职业卫生与职业病防治研究院	10	23	3.0	4.0
4	于功昌	山东省医学科学院职业卫生与职业病防治研究院	18	46	5.0	6.0