甲基化调控microRNA表达影响胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的研究

• 作者: 刘戟 孙艺 彭恒 杨晓龙 杨秋韵 胡开锋 董婧颖 陈利弘 马兰枝
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: microRNA 甲基化 5-Aza-CdR 胰腺癌 增殖 迁移
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 819-823
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的 研究基因启动子区甲基化对胰腺癌相关microRNA(miR34a、miR34b、miR148a、miR203a)表达水平的调控,及其对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响.方法 通过5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)去甲基化处理胰腺癌细胞MIAPaca-2,使用甲基化特异性PCR (methylation-specific PCR,MSP)法检测60 μmol/L5-Aza-CdR处理组及0μmol/L对照组MIAPaca-2细胞目标microRNA启动子甲基化水平的变化;用荧光实时定量PCR检测处理组及对照组目标microRNA表达水平的改变;CCK-8法、划痕实验以及Transwell法检测胰腺癌细胞去甲基化处理后处理组和对照组增殖、迁移、侵袭能力的变化.结果 MSP法结果显示处理组较未处理组目标microRNA甲基化M条带灰度值减弱,非甲基化U条带灰度值增强,处理组目标microRNA启动子甲基化程度较对照组减弱.荧光实时定量PCR结果显示处理组较未处理组目标microRNA相对表达量升高(P＜0.05),处理组microRNA的表达水平随去甲基化处理而升高.CCK-8法显示随着药物处理浓度的增加,处理组细胞抑制率增高,去甲基化处理抑制了胰腺癌细胞的增殖能力.划痕实验结果显示处理组较未处理组细胞伤口愈合率降低(P＜0.01),去甲基化处理降低了胰腺癌细胞的迁移能力.Transwell法结果显示处理组较未处理组穿膜细胞数减少(P＜0.01),去甲基化处理降低了胰腺癌细胞的侵袭能力.结论 肿瘤细胞去甲基化处理,导致4种目标microRNA高表达,抑制了胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力.