副溶血性弧菌高免卵黄抗体的制备和不同提纯方法效果的比较

• 作者: 宋佳音 宋秀玲 庞博 徐坤 曲笑锋 李丽 王梦涵 翟玥 金明华 高孜博
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 副溶血性弧菌 鸡卵黄抗体 聚乙二醇法 氯仿法
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 方法学
• 页码范围: 441-445
• 页数: 5页
• 分类号: S852.43
• 字数: 3746字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20170245

摘要

目的:通过比较聚乙二醇(PEG)沉淀法、氯仿抽提法和氯仿/PEG法3种卵黄抗体(IgY)提纯方法的提纯效果,为批量提纯高质量IgY提供依据.方法:制备副溶血性弧菌灭活疫苗,采用肌肉多点注射法免疫高产蛋鸡,收集鸡蛋,分别采用PEG沉淀法、氯仿抽提法和氯仿/PEG法对鸡蛋中的IgY进行提纯,比较3种提纯方法获得的IgY的蛋白质量浓度、抗体效价和纯度,结合操作过程、成本效益及安全性对3种提纯方法进行综合分析比较.结果:3种方法所提纯的IgY中,蛋白质量浓度从高到低依次为氯仿抽提法、氯仿/PEG法、PEG法;抗体效价相差不大,氯仿抽提法稍高;抗体纯度由高到低依次为PEG法、氯仿/PEG法、氯仿抽提法.PEG法安全性较好,但提取效率相对较低,成本投入较高;氯仿抽提法能够高效地从卵黄中获得IgY,但提取物中掺杂了大量的杂质蛋白;氯仿/PEG法提纯效率高,抗体纯度好,成本效益相对较高.结论:PEG法适用于实验室中少量IgY的提取;氯仿/PEG法的提取效率高,抗体纯度好,可用于批量提取高质量的IgY.