胰腺癌细胞外泌体通过激活线粒体 凋亡途径促进 β细胞凋亡

• 作者: 吴雪峰 孙洪帅 崔连鸷 张晓伟 王博
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 外泌体 胰腺癌 微小RNA-204 Bcl-2 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2172-2178
• 页数: 7页
• 分类号: R735.9|R363
• 字数: 5088字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.12.010

摘要

目的:探讨胰腺癌细胞分泌的外泌体(exosome)对胰岛β细胞存活率和功能的影响及作用机制.方法:采用外泌体提取试剂盒提取小鼠胰腺癌细胞Pan02和MPC-83上清液外泌体,经磷钨酸染色后于透射电镜下鉴定形态;外泌体经荧光标记后与小鼠胰岛瘤MIN6细胞共孵育48 h,检测外泌体分泌水平和MIN6细胞的摄取水平;MTT和葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)实验分别检测各组细胞的存活率和胰岛素分泌功能;qPCR检测微小RNA-204(miR-204)和Bcl-2 mRNA的表达;Western blot检测线粒体凋亡信号通路相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3和细胞色素C(Cyt-C)的表达.结果:透射电镜结果显示2种胰腺癌细胞均能分泌外泌体,且Pan02细胞分泌更多.荧光标记的外泌体与胰岛β细胞共孵育结果显示,β细胞能够大量摄取胰腺癌细胞分泌的外泌体.MTT和GSIS实验结果显示,外泌体处理组的MIN6细胞存活率和高糖刺激的胰岛素分泌量显著低于未处理组(P<0.01).qPCR结果显示胰腺癌细胞分泌的外泌体富含miR-204,且外泌体处理后的MIN6细胞内Bcl-2的mRNA表达显著下调(P<0.01).Western blot结果显示,外泌体处理的MIN6细胞内Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05),Bax、cleaved caspase-3和Cyt-C蛋白表达显著上调(P<0.01).结论:胰腺癌细胞能够分泌外泌体,且该外泌体能够被胰岛β细胞摄取.胰腺癌细胞分泌的外泌体可以降低β细胞存活率和β细胞胰岛素的分泌功能,其机制可能通过外源性上调β细胞内miR-204的表达,进而抑制Bcl-2的mRNA和蛋白表达,最终激活β细胞内线粒体凋亡信号通路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔连鸷	吉林省肿瘤医院检验科	4	29	3.0	4.0
2	王博	吉林省疾病预防控制中心理化所	26	44	4.0	6.0
3	张晓伟	吉林省肿瘤医院检验科	21	107	6.0	9.0
4	孙洪帅	吉林省肿瘤医院检验科	9	43	3.0	6.0
5	吴雪峰	吉林省肿瘤医院检验科	21	106	6.0	9.0