抗HU蛋白抗体抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成实验

• 作者: 刘成华 刘方杰 刘玉 张军 李静静 杨光 高亚萍
• 来源期刊: 解放军医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 HU蛋白 多克隆抗体 生物膜
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 1160-1164
• 页数: 5页
• 分类号: R378.11|Q511
• 字数: 4457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2017.12.018

摘要

目的 探讨靶向金黄色葡萄球菌DNA结合蛋白HU的多克隆抗体是否能够抑制生物膜的形成.方法 以金黄色葡萄球菌NCTC-8325基因组为模板,PCR扩增HU基因,构建重组表达载体pET-28a-HU,亚克隆至大肠埃希菌BL21(DE3),利用IPTG诱导表达,通过镍亲和树脂纯化获得HU蛋白.利用多克隆抗体制备技术获得兔源抗HU血清,利用ProteinA树脂纯化多克隆抗体,利用ELISA和Western blot实验检测抗体亲和力,并通过金黄色葡萄球菌生物膜形成实验验证抗体活性.结果 重组蛋白HU以可溶形式表达,成功制备了高滴度(＞1∶100000)的兔源抗HU多克隆抗体.生物膜形成后结晶紫染色数据显示抗HU多克隆抗体浓度在75μg/ml和0.6μg/ml时OD595读值分别为0.052和1.220,Confocal实验表明抗HU多克隆抗体能够明显抑制金黄色葡萄球菌生物的形成,且呈浓度依赖性.结论 靶向金黄色葡萄球菌HU蛋白的多克隆抗体能够抑制金黄色葡萄球菌生物膜的形成,这可能成为一种新的治疗金黄色葡萄球菌感染策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨光	军事医学科学院基础医学研究所	44	152	7.0	9.0
2	刘玉	军事医学科学院基础医学研究所	14	26	3.0	4.0
3	高亚萍	军事医学科学院基础医学研究所	26	80	5.0	7.0
4	张军	河南大学医学院	64	269	9.0	14.0
5	李静静	河南大学医学院	8	1	1.0	1.0
6	刘方杰	军事医学科学院基础医学研究所	3	7	2.0	2.0
7	刘成华	军事医学科学院基础医学研究所	5	13	3.0	3.0