LPS对鹅等级卵泡基质层TLR家族基因表达的影响

• 作者: 应诗家 戴子淳 施振旦 郭佳佳
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 种鹅 等级卵泡 内毒素脂多糖(LPS) TLRs
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 1147-1156
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2017.06.015

摘要

[目的]研究鹅卵泡基质层TLR家族基因表达谱及其对LPS不同处理时间后的反应性.[方法]在大群散养条件下,实时观察鹅产蛋过程,分别在产蛋后8和2h以及产前4、16和28 h注射LPS,并在产蛋后8h屠宰,即LPS作用0、6、12、24和36 h,每个时间点各5只鹅.屠宰时,取卵巢,观察卵泡外观形态,并分离F1-F5级卵泡基质层.试验鹅自由饮水、自由采食、自然光照.LPS处理0、24和36 h的单个F1-F5级卵泡基质层或卵泡用于基因表达分析,而其他LPS处理的每只鹅等级卵泡基质层RNA等质量混合后用于基因表达分析.采用普通PeR方法检测10种鸟类TLR家族基因的在鹅等级卵泡基质层的表达谱,其中以脾脏组织为阳性对照,以不加cDNA模板为阴性对照.根据RT-PCR的表达谱结果,采用Real-time PCR检测不同等级卵泡基质层TLRs表达水平以及不同LPS处理时间对基质层TLRs表达水平的影响.对不同等级卵泡和不同LPS处理时间对基质层TLRs表达的数据,采用单因子方差分析,Duncan法多重比较;对变性卵泡与对照组基质层TLRs表达水平的数据,采用T检验分析.[结果](1)已公开的10种鸟类TLR家族基因,如TLRs 1A、1B、2A、2B、3、4、5、7、1 5和21基因均在等级卵泡基质层组织中表达.(2)随等级卵泡生长,TLRs 2A和1 5表达水平逐渐升高;F1级卵泡基质层TL R2A表达水平显著高于F3、F4和F5级卵泡,TLR15表达水平显著高于F5级卵泡;其他TLR家族基因,如TLRs 1A、1B、2B、3、4、5、7和21在不同等级卵泡基质层中的表达水平差异不显著.(3)在LPS处理0、6和12 h时,等级卵泡外观形态无明显变化,但在LPS处理24 h时,3只鹅的等级卵泡呈深黄色胶冻状变性;在LPS处理36 h时,全部试验鹅等级卵泡呈深黄色胶冻状变性.(4)与对照组(LPS处理0h)相比,TLRs 2A、4和5表达水平在LPS处理12和24 h时显著升高,TLR2B表达水平在LPS处理24 h时显著升高,TLRs 7和15表达水平在LPS处理6-24h期间均显著升高,而TLRs 1A、1B、3和21表达水平在LPS处理6-24h期间差异不显著.(5)与等级卵泡基质层相比,在LPS处理24和36 h的变性卵泡中,TLRs 1A、2A、2B、4、5、7和15表达水平显著升高,TLR3表达水平显著降低,而在LPS处理36 h的变性卵泡中,TLRs 1B和21表达水平显著升高.[结论]已发现的10种鸟类TLR家族基因均在种鹅等级卵泡基质层表达,且随LPS作用时间延长,等级卵泡形态结构发生变化,但TLRs表达水平逐渐升高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施振旦	江苏省农业科学院畜牧研究所动物品种改良和繁育重点实验室	72	277	9.0	11.0
2	应诗家	江苏省农业科学院畜牧研究所动物品种改良和繁育重点实验室	17	66	6.0	7.0
3	郭佳佳	江苏省农业科学院畜牧研究所动物品种改良和繁育重点实验室	2	3	1.0	1.0
4	戴子淳	江苏省农业科学院畜牧研究所动物品种改良和繁育重点实验室	7	22	3.0	4.0