利用框内缺失法构建变异链球菌srtA基因缺失株

• 作者: 刘海霞 彭显 邹玲 陈璇
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 变异链球菌 srtA基因缺失 框内缺失法
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 588-592
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 5067字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7518/hxkq.2017.06.005

摘要

目的 利用框内缺失法,通过IFDC2基因盒及融合聚合酶链反应(PCR)、同源重组技术构建变异链球菌UA159菌株srtA基因缺失株.方法 PCR扩增变异链球菌UA159菌株srtA基因上下游同源片段及IFDC2基因盒,将这些片段连接、转化入UA159,替换srtA基因同源片段,筛选、鉴定红霉素抗性克隆;PCR扩增、连接UA159 srtA基因上下游同源片段,将连接片段转化入前述红霉素抗性克隆中替换IFDC2同源片段,筛选、鉴定抗苯丙氨酸类似物p-chloro-phenylalanine(p-Cl-Phe)克隆.结果 PCR、琼脂糖凝胶电泳及DNA测序结果均证明srtA基因编码区被完全删除,上下游片段无缝连接,成功构建UA159 srtA基因缺失株.结论本研究成功构建了无标记的变异链球菌UA159 srtA基因缺失株,为进一步研究该基因在生物膜中的作用及其调控机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭显	口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科	8	28	2.0	5.0
2	邹玲	口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科	11	40	4.0	6.0
3	陈璇	口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科	3	10	1.0	3.0
4	刘海霞	口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科	2	10	1.0	2.0