动物药材DNA提取方法优化和市售药材DNA条形码鉴定研究

• 作者: 刘旭朝 刘金欣 孙伟 孙稚颖 宋经元 石林春
• 来源期刊: 世界科学技术-中医药现代化
• 学科: 医学
• 关键词: 动物药材 DNA条形码 DNA提取 裂解液 EDTA
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 技术应用研究
• 页码范围: 602-609
• 页数: 8页
• 分类号: R931.2
• 字数: 4514字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11842/wst.2017.04.010

摘要

目的:对动物药材DNA提取方法进行优化,利用优化方法提取市售动物药材DNA并进行DNA条形码鉴定.方法:基于SDS法DNA提取原理,比较裂解液中不同EDTA浓度(0.025、0.25、0.5 mol· L-1)、是否含NaC1和Triton X-100等因素对不同用药部位动物药材DNA提取质量的影响,筛选得到最佳裂解液配方;使用优化的裂解液配方提取121份市售动物药材DNA并进行基原物种鉴定.结果:裂解液配方为1％ SDS、0.03 mol· L-1Tris-HCl、0.25 mol·L-1EDTA、0.2 mol·L1NaCl对不同用药部位动物药材DNA提取效果最佳,并可实现对蝉蜕等提取困难样本DNA的提取;利用优化裂解液提取的121份市售动物药材DNA满足中药材分子鉴定后续实验要求,所有市售动物药材均可准确鉴定到基原物种.结论:本研究优化的裂解液配方可用于除壳类、分泌物类、加工品外不同用药部位动物药材的DNA提取,为动物药材分子鉴定提供了技术支持.