脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶-1基因敲低人肺癌细胞A549构建及其对线粒体功能影响

• 作者: 刘刚 李春艳 杨拉维 林子英 王亚红 许文亚
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: 酶脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶-1 A549细胞 活性氧 线粒体功能
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 140-143,147
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 语种: 中文

摘要

目的 建立脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶-1(APE1)基因敲低人肺癌细胞A549,并初步观察线粒体功能变化.方法 APE1基因shRNA序列与pSIREN-RetroQ慢病毒载体经酶切连接重组体(pSIREN-RetroQ-shAPE1),再与病毒包装质粒共转染293T细胞;收集病毒液并感染A549细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞株A549shAPE1.免疫印迹法检测稳定细胞株中APE1干扰效率.用双氧水处理A549 shCotrol和A549 shAPE1细胞24 h,分析细胞内ATP及活性氧(ROS)变化.结果 经PCR和测序鉴定成功构建重组慢病毒载体pSIREN-RetroQ-sh APE1,免疫印迹法证实A549 shControl和A549 shAPE1稳定细胞株构建成功;双氧水处理后,A549shAPE1细胞中ATP活性明显低于A549shControl细胞(P＜0.05),而ROS明显增加(P＜0.01).结论 APE1干扰可影响肺癌细胞中线粒体功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨拉维	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	12	16	2.0	2.0
2	王亚红	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	9	13	2.0	2.0
3	刘刚	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	10	18	3.0	3.0
4	林子英	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	4	7	1.0	2.0
5	许文亚	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	3	5	1.0	2.0
6	李春艳	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	5	5	1.0	1.0