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摘要:
目的:克隆人乳头状瘤病毒(HPV) 11型E2基因片段,构建真核生物表达载体,研究低危型HPV E2基因的表达对正常鼻咽部黏膜细胞(NP69-SV40T)增殖的影响作用.方法:提取HPV11型DNA,设计E2基因引物,PCR扩增E2基因全长序列,分子克隆至含有绿色荧光蛋白的pEGFP-C1表达载体,构建真核表达载体pEGFP-C1-E2,转染至NP69-SV40T细胞内,转染后行Western blot、流式细胞仪检测以及CCK8检测,观察对NP69-SV40T细胞增殖活性的影响.结果:成功克隆和构建了pEGFP-C1-E2表达载体,转入NP69-SV40T细胞后,证明了其在NP69-SV40T细胞的表达,CCK8和流式细胞仪检测细胞周期,实验结果表明低危型HPV E2转染NP69-SV40T细胞可以促进细胞增殖,同时Western blot检测细胞周期素CDK2和CDK4发现,在3组(转染组、对照组和空白组)中表达量无统计学差异.结论:表达E2的pEGFP-C1-E2真核表达质粒能有效转染NP69-SV40T,并且转染后E2基因的表达能促进细胞的增殖.这些结果为深入研究复发性呼吸道乳头状瘤病的发生和发展提供了新的思路和方法.
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内容分析
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文献信息
篇名 HPV E2基因在鼻咽上皮细胞中的表达以及对细胞增殖的影响
来源期刊 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 学科 医学
关键词 复发性呼吸道乳头状瘤病 人乳头状瘤病毒 E2基因 细胞增殖
年,卷(期) 2017,(3) 所属期刊栏目 论著——研究报告
研究方向 页码范围 211-214
页数 4页 分类号 R734
字数 语种 中文
DOI 10.13201/j.issn.1001-1781.2017.03.011
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王军 186 1435 21.0 31.0
2 肖洋 14 9 2.0 2.0
3 王甜甜 2 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
复发性呼吸道乳头状瘤病
人乳头状瘤病毒
E2基因
细胞增殖
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
半月刊
1001-1781
42-1764/R
大16开
武汉解放大道1277号
1987
chi
出版文献量(篇)
10926
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33
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