摘要:
蔗糖是植物体中重要的碳源物质,参与植物的生长、发育乃至信号转导等多个生理过程.植物体在长距离运输蔗糖的过程中,蔗糖转运蛋白(sucrose transporters,SUT)基因起关键作用.为了解该基因在牡丹(Paeonia suffruticosa)植株体内的转运机制,以洛阳红牡丹(P.suffruticosa'Luoyanghong’)为材料,利用反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和RACE (rapid-amplification of cDNA ends)方法从叶片中克隆了蔗糖转运蛋白基因,命名为PsSUT2.该基因全长2 347bp,包含1 803bp的开放阅读框,编码601个氨基酸,GenBank登录号为KC542396,相对分子量为64.6 kD,等电点为6.14,与葡萄(Vitis vinifera)中的蔗糖转运蛋白基因同源性最高,为75.27%.该蛋白属于易化子超家族(major facilitator superfamily,MFS)成员,包含12个跨膜螺旋.采用qRT-PCR和离子色谱法研究牡丹不同生育期与不同组织部位中PsSUT2基因的表达量及可溶性糖的含量变化,结果表明,在牡丹的年生长周期中,PsSUT2在牡丹的根、老茎、叶和鳞芽(花瓣)中均有表达,但主要在盛花期的花瓣中大量表达,相对表达量为11.18,是同时期根的4.26倍、小风铃期根的4.40倍、圆桃期花瓣的10.48倍、鳞芽分化期鳞芽的30.55倍,与同时期的其他部位乃至其他时期的所有部位相比差异显著,因此推测该基因可能参与了“库”端蔗糖的卸载.蔗糖、葡萄糖和果糖的含量在不同生育期、不同部位间存在较大差异,盛花期到来之前,鳞芽(花瓣)中蔗糖含量几乎为0,而葡萄糖和果糖水平较高,说明洛阳红牡丹花瓣属于己糖(葡萄糖和果糖)积累型器官,己糖的不断积累有利于花朵的开放.相关性分析表明,PsSUT2的表达量与与叶片中蔗糖的含量及根中葡萄糖含量成显著负相关,说明该基因的表达可能受叶片中蔗糖及根中葡萄糖的反馈抑制.本研究结果为进一步了解PsSUT2基因的功能、利用该基因进行牡丹分子育种和遗传改良提供理论依据.