构建靶向性高尔基体膜蛋白高尔基体蛋白73修饰脂质体介导单纯疱疹病毒胸苷激酶诱导肝癌细胞凋亡

• 作者: 于保锋 刘畅 姚志坚 孟凡秀 张智宣 张琪 张英敏 徐钧 曾思衡 李勇芳 李高凯 李高鹏 王海龙 袁洋洋 解军 赵娜 郭睿 陆嘉慧
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 关键词: GP73 阳离子脂质体 肝癌细胞 转染效率 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（19）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 2273-2279
• 页数: 7页
• 字数: 5012字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2017.19.005

摘要

目的 构建一种具有靶向性的非病毒基因治疗载体高尔基体蛋白73(GP73)-脂质体lipoplexes,并检测其对肝癌细胞HepG2和正常肝细胞HL-7702的转染效率和凋亡的影响.方法 以水溶性碳二亚胺为交联剂将GP73与lipoplexes偶联.用GP73-lipoplexes运载标记有绿色荧光蛋白(green lfuorescent protein,GFP)荧光报告基因的PGenesil-l质粒转染肝癌细胞组HepG2和肝正常细胞组HL-7702,通过荧光显微镜观察被转染细胞GFP的表达情况,流式细胞术检测转染效率.并用GP73-lipoplexes运载含治疗基因HSVtk的质粒PBI-SUR-TK转染肝癌细胞和肝细胞,经RT-PCR和Western blot检测细胞中HSVtk表达情况,流式细胞术和CCK-8检测细胞凋亡情况.结果 经GP73修饰的lipoplexes转染的肝癌细胞组[(26.37±0.76)％]比肝细胞组[(9.68±0.57)％]有更高的转染效率和更多的HSVtk基因的表达,肝癌细胞增殖能力明显减弱,凋亡显著.结论 GP73修饰的lipoplexes介导的HSVtk自杀基因系统对肝癌细胞有治疗作用,可以尝试作为一种靶向性杀伤肝癌细胞的非病毒基因转运载体.