人Ⅱ型高尔基体膜蛋白73多克隆抗体的制备及免疫学鉴定

• 作者: 吴玉 徐霞 林云恩 蔡媛媛
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: 高尔基体膜蛋白73 肝癌 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 181-183
• 页数: 3页
• 字数: 3325字
• 语种: 中文

摘要

目的 制备人Ⅱ型高尔基体膜蛋白73(Golgi protein 73,GP73)的多克隆抗体,为进一步研究GP73的功能奠定基础.方法 利用重组原核表达载体PET-32a-GP73在大肠杆菌BL21中诱导表达,利用切胶方法 回收纯化蛋白,并免疫新西兰兔制备多克隆抗体.制备的抗体经硫酸铵沉淀纯化后,用ELISA法和Western blot对多克隆抗体进行效价和特异性检测,用免疫组织化学法(IHC)检测纯化抗体在不同肝组织中识别GP73的能力.结果 GP73蛋白表达成功,并成功获得纯化的GP73蛋白及兔抗GP73多克隆抗体;ELISA法测定多克隆抗体效价>16 000;Western blot证明多克隆抗体的特异性良好;IHC显示GP73蛋白在正常肝组织中仅表达于胆管上皮细胞,而在肝癌组织中表达于肝癌细胞和胆管上皮细胞.结论 成功获得了纯化的GP73蛋白及高效价的多克隆抗体,肝脏组织的IHC验证了其良好的特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡媛媛	广州医学院检验系	4	18	3.0	4.0
2	徐霞	广州医学院检验系	69	314	10.0	13.0
3	林云恩	广州医学院第一附属医院病理科	35	204	9.0	12.0
4	吴玉	广州医学院检验系	6	11	2.0	3.0